Хориоаллантоисная мембрана цыплят или модель опухоли CAM: метод in Ovo для моделирования периневральной инвазии опухолевых клеток

При некоторых метастазирующих видах рака опухолевые клетки распространяются от места возникновения и проникают в нервные ткани, что называется периневральной инвазией или ПНИ.

ПНИ может быть продемонстрирован в яйце на поверхности хориоаллантоисной мембраны или КАМ, которая имитирует базальную мембрану эпителиальной ткани человека.

Для начала возьмем жизнеспособное, оплодотворенное куриное яйцо с частично раскрытой скорлупой, обнажающей полностью развитый КАМ.

Затем изолируйте ганглии дорсальных корешков или DRG от спинного мозга мыши. DRG представляет собой скопление сенсорных нейронов, с помощью которых раковые клетки проникают в периневральное пространство.

Инкубируйте DRG в подходящей среде с флуоресцентным красителем, чтобы пометить их для удобства визуализации. Теперь перенесите DRG на поверхность CAM без разрыва мембраны.

Накройте яйцо прозрачной пленкой, чтобы предотвратить микробное заражение. После этого инкубируйте яйцо, чтобы облегчить интеграцию DRG в CAM.

После инкубации высадите флуоресцентно меченые раковые клетки на сухую поверхность CAM, подальше от DRG. Сухая поверхность сводит к минимуму распространение раковых клеток и способствует регулярному образованию опухо