Ортотопическая инокуляция клеток рака щитовидной железы в щитовидную железу мыши: процедура создания мышиной модели ортотопического рака щитовидной железы

Ортотопическая инокуляция облегчает доставку раковых клеток животному-реципиенту в орган или участок, который соответствует тканевому гистотипу. Для начала подготовьте обезболенную обнаженную мышь с ослабленным иммунитетом в положении лежа на спине.

Далее сделайте хирургический разрез в области шеи, чтобы выявить слюнные железы. Сместите слюнные железы и рассеките мышцы ремня, чтобы обнажить нижележащую трахею и щитовидную железу.

Щитовидная железа, эндокринная железа, состоит из двух долей, которые лежат по обе стороны от трахеи и окружают перстневидный хрящ. Эти две доли соединены тонкой полоской ткани щитовидной железы, называемой перешейком.

Теперь приготовьте в шприце суспензию клеток рака щитовидной железы с подходящим буфером. Осторожно введите клеточную суспензию в долю щитовидной железы мыши.

Впоследствии переместите слюнные железы и зашите разрез. Дайте мыши восстановиться. Еженедельно наблюдайте за мышью, чтобы наблюдать за ростом ортотопических опухолей в доле щитовидной железы.

Для инокуляции клеток ортотопической опухоли щитовидной железы суспензируйте аликвоту клеток Cal62 в 5 микролитрах PBS и подкожно введите 100 микролитров анальгетика и 100 микролитров антибиотика 7-недельной мышке BALB/c. После подтверждения отсутствия реакции на защемление пальца ноги поместите животное под препарирующий микроскоп и продезинфицируйте шею животного йодоповидоном.

Далее сделайте примерно 2-сантиметровый разрез на коже и сместите слюнные железы, чтобы обнажить шею. С помощью щипцов и/или ножниц рассекайте мышцы ремня, чтобы обнажить трахею и щитовидную железу, и с помощью шприца объемом 10 микролитров введите 5 микролитров опухолевых клеток в правую щитовидную дольку, расположенную сбоку от перстневидного хряща.

Когда все клетки будут доставлены, переместите слюнные железы и наложите нерассасывающиеся швы, покрытые шелком, чтобы закрыть разрез. Затем нанесите йодоповидон на область раны и положите мышь на термическое одеяло с контролем до полного выздоровления.