Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 2:59 мин. • April 30th, 2023
Сфероиды представляют собой трехмерные сферические клеточные агрегаты in vitro, которые имитируют микроокружение опухоли in vivo и помогают изучать опухолевую прогрессию. Чтобы сохранить эти сфероиды путем встраивания, начните с взятия стерильной пробирки, содержащей сфероиды в желаемом буфере.
Обработайте сфероиды параформальдегидом. Параформальдегид сшивает клеточные белки, что приводит к стабилизации и сохранению клеточной структуры. Центрифугируйте сфероиды и удалите пароформальдегидсодержащую надосадочную жидкость. Повторно суспендируйте сфероидную гранулу в буфере.
Далее приготовьте нужную концентрацию раствора расплавленного агарозного геля. Сделайте каплю агарозного геля на предметное стекло микроскопа. Держите предметное стекло на нагревательном блоке, чтобы избежать застывания агарозы.
С помощью микропипетки с широким наконечником отверстия соберите сфероиды из пробирки. Осторожно введите сфероиды в центр агарозной гелевой капли, не касаясь предметного стекла микроскопа. Затем инкубируйте предметное стекло при подходящей температуре, чтобы позволить ЭХМ затвердеть и захватить сфероиды внутри.
Аккуратно переложите полутвердую каплю со предметного стекла микроскопа в тканев
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео