Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 2:31 мин. • April 30th, 2023
Пены, полученные на основе ЭКМ, представляют собой высокопористые каркасы, полученные с использованием внеклеточного матрикса – неклеточного компонента микроокружения тканей.
Чтобы изготовить пену, полученную из ЭХМ, начните с взятия однородной суспензии ультратонкого порошка ЭХМ в пробирке. Инкубируйте суспензию при теплой температуре при постоянном перемешивании, чтобы предотвратить комкование ЭХМ.
Далее с помощью шприца перенесите разжиженную суспензию ECM в нужную форму. Охладите форму на ночь, чтобы ECM затвердел. ECM затвердевает, образуя трехмерную сетевую структуру.
Наконец, поместите твердую форму, содержащую ECM, в колбу с лиофилизатором. Подключите колбу к системе сублимационной сушилки. Внутри лиофилизатора образец подвергается воздействию сверхнизкой температуры и низкого давления. Это приводит к образованию кристаллов льда в междоузельных пространствах сети ECM.
Со временем давление и температура лиофилизатора постепенно повышаются. Эти условия способствуют сублимации — процессу, при котором твердое вещество непосредственно переходит в газообразную форму, а не плавится.
Газообразные пары испаряются, оставляя после себя пустые пространства внутри сети ECM, тем самым образуя пористый каркас, полученный из ECM.
Инкубируйте суспензию ECM при температуре 37 градусов Цельсия с непрерывным перемешиванием при 120 об/мин до тех пор, пока суспензия не станет теплой. Затем с помощью 0,2 молярной уксусной кислоты разбавьте образец суспензии до нужной концентрации. С помощью 3-миллилитрового шприца и иглы 18G заполните нужную форму суспензией ECM.
Пенопласты могут быть изготовлены в различных геометриях в зависимости от формы формы. Накройте крышкой и заморозьте формочки при температуре минус 20 или минус 80 градусов по Цельсию. Затем поместите формочки в колбу с лиофилизатором. Подключите колбу к лабораторной сублимационной сушилке и высушите формы в течение 24 часов или до полного высыхания.