Создание трехмерной ко-культурной модели ганглиев дорсальных корешков мыши и раковых клеток: модель in vitro для изучения периневральной инвазии раковых клеток

Периневральная инвазия или ПНИ относится к миграции раковых клеток по нервам и их последующему вторжению в периневрию – подходящую микросреду для роста рака и метастазирования.

Чтобы имитировать PNI in vitro, начните с добавления капли внеклеточного матрикса или суспензии ECM на чашку для культуры таким образом, чтобы она приняла форму полусферы. Теперь инкубируйте чашку для культивирования, чтобы усилить структурные и функциональные особенности 3D-каркаса.

Затем осторожно поместите предварительно собранный ганглий дорсального корешка или DRG, скопление сенсорных нейронов, в центр полутвердой капли ECM. Инкубируйте для встраивания DRG в каплю ECM.

После этого добавьте подходящую питательную среду и инкубируйте. Обогащенная питательными веществами ЭКМ способствует прорастанию DRG в небольшие нервные выступы, называемые нейритами, которые разрастаются радиально по направлению к окружности капли.

Удалите отработанную среду, чтобы подготовить каплю ECM для последующего анализа. Семена флуоресцентно окрашивают прилипшими раковыми клетками над каплей. Из-за полусферической формы раковые клетки перекатываются и расселяются по периферии капель.

Инкубируйте чашку для культивирования, чтобы