Метилтиазолилтетразолий или МТТ: колориметрический анализ для измерения лекарственной устойчивости путем определения метаболической активности в раковых клетках

Анализ на метилтиазол тетразолий или МТТ позволяет оценить жизнеспособность клеток на основе измерения клеточной метаболической активности.

Для начала анализа необходимо подготовить ряд возрастающих концентраций интересующего препарата. Добавьте равные объемы различных концентраций препарата в лунки многолуночного планшета.

Затем пипетку пипеткой ввели суспензию желаемых чувствительных к лекарственным препаратам родительских раковых клеток и их лекарственно-устойчивых вариантов в подходящей среде, каждая из которых была помещена в набор лунок, содержащих различные концентрации лекарственного средства. Инкубируйте тарелку.

В культуре чувствительные к лекарствам раковые клетки чувствительны к молекулам лекарства, что приводит к гибели клеток даже при низких концентрациях. Напротив, лекарственно-устойчивые раковые клетки нечувствительны к молекулам лекарств, что способствует их выживанию и пролиферации даже при более высоких концентрациях лекарств.

Обработайте клетки раствором МТТ и инкубируйте. МТТ, положительно заряженная соль тетразолия, легко проникает в метаболически активные клетки. В этих клетках NAD(P)H-зависимые ферменты оксидоредуктазы восстанавливают соль МТТ до нерастворим