Экстракция экзосом на основе магнитных шариков: метод выделения специфических экзосом из биожидкостей

Экзосомы представляют собой внеклеточные везикулярные структуры, секретируемые клетками в биожидкости. Чтобы захватить определенные экзосомы из биожидкостей, начните с взятия магнитных шариков, покрытых стрептавидином, в пробирку.

В эту пробирку добавьте биотинилированные антитела к человеку. Биотин, присутствующий в антителах, обладает высоким сродством к стрептавидину, присутствующему в магнитных шариках. Это приводит к конъюгации антител с магнитными шариками.

Затем добавьте богатый белком блокирующий раствор в пробирку, содержащую магнитные шарики, меченные антителами. Белки в блокирующем растворе связываются со свободными участками на магнитных шариках и повышают специфичность связывания экзосом.

Теперь дополните пробирку образцом биожидкости, богатой экзосомами. Инкубируйте трубку с перемешиванием. Экзосомы в биожидкости демонстрируют специфические поверхностные рецепторы, которые помогают им связываться с антителами, прикрепленными к поверхности магнитных шариков.

Далее поместите трубку в магнитное поле. Под воздействием магнитного поля связанные с экзосомами магнитные шарики прикрепляются к поверхности трубки. Затем с помощью микропипетки отсасывают остатки биожидкости из п