Культивирование салисфер из ткани слюнных желез: метод получения салисфер из эпителиальных клеток, полученных из слюнных желез человека

Салисферы представляют собой in vitro, самоагрегирующие культуры эпителиальных клеток, полученные из слюнной железы. Чтобы культивировать салисферы, начните со взятия ткани слюнных желез человека в культуральную тарелку.

С помощью ножниц измельчите ткань на мелкие кусочки. Затем дополните эти кусочки раствором диссоциации, содержащим коллагеназу и ферменты и инкубируйте. Эти ферменты переваривают внеклеточный матрикс, присутствующий в ткани.

Далее растираем для гомогенизации ткани. На этом этапе эпителиальные клетки и эритроциты высвобождаются в раствор. Затем используйте клеточный фильтр и отфильтруйте гомогенат ткани в свежую коническую трубку, чтобы удалить непереваренные кусочки ткани и мусор. Центрифуга для гранулирования ячеек.

После центрифугирования выбросьте надосадочную жидкость и повторно суспендируйте клеточную гранулу в буфере для лизиса эритроцитов. Этот буфер разрывает эритроциты, присутствующие в клеточной суспензии.

Теперь центрифуга для гранулирования эпителиальных клеток. Ресуспендируйте гранулу в соответствующую среду для роста эпителиальных клеток. Кроме того, подготовьте планшет для культивирования салисферы, покрыв его лункой матрицей с жидкой базальной мембр