Генерация кальвариального окна в мышиной модели: хирургическая процедура для создания окна в верхней части черепа мыши

Кальвария — это верхняя часть черепа, которая покрывает и защищает полость черепа — полое пространство внутри черепа, которое окружает мозг. Он состоит из пяти костей, соединенных фиброзной тканью, называемой швами, включая коронарный, сагиттальный и лямбдоидный швы.

Чтобы создать кальвариальное окно для доступа к мозгу, сначала возьмите мышь под наркозом с бритой головой.

Закрепите животное на стереотаксическом блоке, стабилизируя его череп. Поддерживайте его температуру тела с помощью грелки.

Затем простерилизуйте кожу головы и сделайте небольшой разрез вдоль центральной срединной части черепа.

Впоследствии ориентируйте сверло перпендикулярно брегме – точке пересечения коронального и сагиттального швов.

Расположите дрель в намеченном месте, на подходящем расстоянии от брегмы.

Осторожно наведите сверло на череп, увлажняя целевое место, чтобы предотвратить повреждение тканей от накопления тепла.

Просверлите на небольшую глубину в кальварии, чтобы сформировать известковое окно.

После создания окна мышь может быть использована для дальнейших экспериментальных процедур.

Перед началом процедуры поверните стопорный замок на сверле, чтобы можно было вставить в сверло адаптер для сверла и стерильное сверло диаметром 1 миллиметр, и вручную затяните фиксаторы сверла, чтобы зафиксировать сверло. Прикрепите дрель к стереотаксической рамке.

После подтверждения отсутствия реакции на педальный рефлекс поместите мышь под наркозом на раму и с помощью тупого конца аппликатора с ватным наконечником расположите зубы в углублении мундштука.

Прижмите левую ушную планку к медиальному кантусу левого уха, чтобы стабилизировать череп, и используйте винт на стереотаксической раме, чтобы зафиксировать череп на месте. Затем таким же образом закрепите другую сторону черепа правой ушной планкой.

Чтобы сделать окно, очистите кожу головы тремя последовательными, чередующимися скрабами с раствором бетадина и 70% этанолом, и с помощью стерильного скальпеля сделайте 3-миллиметровый разрез через кожу вдоль центральной срединной стороны черепа по линии сагиттального шва.

Определите и сориентируйте стерильное сверло перпендикулярно брегме, обязательно сбросив цифровую шкалу нониуса на ноль, и переместите сверло на 2 миллиметра латерально к сагиттальному шву и на 1 миллиметр впереди коронкового шва.

Отодвиньте кожу от сверла и, используя максимальную скорость и обращая внимание на ориентиры, осторожно просверлите отверстие глубиной примерно 0,5 миллиметра в черепе, охлаждая место сверла каплями стерильного физиологического раствора по мере необходимости.

После того, как отверстие будет изготовлено, осторожно поднимите сверло и снимите сверло со стереотаксической рамки.