Клеточный биолюминесцентный анализ: высокопроизводительный метод комбинаторного скрининга лекарственных средств

Клеточная биолюминесценция является высокочувствительным и быстрым подходом к широкомасштабному скринингу противораковых препаратов.

В этой методике используются опухолевые клетки, экспрессирующие люциферазу – фермент, который катализирует светопроизводящую химическую реакцию, заставляя клетки-хозяева светиться в темноте. Интенсивность излучаемой люминесценции прямо пропорциональна плотности живых клеток.

Для начала засейте клетки, экспрессирующие люциферазу, в оптически прозрачной культуральной пластине, покрытой внеклеточным матриксом или ВКМ, и инкубируйте.

Во время инкубации ВКМ хорошо способствует прикреплению клеток к культуре.

Далее берут концентрированные запасы лекарственной комбинации и добавляют разные объемы питательных сред для приготовления серийного разведения лекарственной смеси.

Теперь удалите питательную среду из прилипших клеток. Добавляйте разные разведения лекарственной комбинации и инкубируйте.

Во время инкубации комбинация препаратов действует синергетически на клеточные мишени.

Теперь удалите содержащую лекарство среду и добавьте свежую среду, содержащую люциферин.

Люциферин диффундирует по мембране и проникает в клетки. Люциферазы, экспрессируемые клетками,