Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 3:55 мин. • April 30th, 2023
Чтобы выделить ядра, начните со взятия свежезамороженного образца глиомы — опухоли, которая возникает в глиальных клетках мозга — в чашке Петри.
Поместите чашку Петри на лед, чтобы избежать деградации тканей.
Далее измельчаем образец ткани на мелкие кусочки.
Добавьте к измельченным кусочкам салфетки предварительно охлажденный буфер для лизиса. Переложите смесь в гомогенизатор Dounce. С помощью пестика гомогенизируйте ткань, чтобы разрушить клетки и инициировать лизис.
Теперь перенесите гомогенат в микроцентрифужную пробирку, содержащую свежий буфер для лизиса.
Механически разрушайте гомогенат с помощью наконечника для дозатора с широким отверстием. Этот этап способствует высвобождению цитоплазматических органелл из клеток.
Затем, используя клеточное сетчатое фильтр соответствующего размера, отфильтруйте гомогенат в свежую пробирку, чтобы удалить остатки тканей и другие загрязнения.
После фильтрации принимают фильтрат, содержащий различные клеточные органеллы.
Центрифугируйте фильтрат на низкой скорости, чтобы гранулировать более плотные ядра на дне, в то время как другие клеточные органеллы остаются в надосадочной жидкости.
Выбросьте надосадочную жидкость, содержащую органеллы. Хра
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео