Фиксация и окрашивание срезов криоконсервированной ткани: процедура обработки замороженных срезов ткани мозга для лазерной микродиссекции

Чтобы дифференцировать специфические клеточные популяции в гетерогенной ткани опухоли головного мозга мыши для их последующей изоляции, начните со взятия предметного стекла, на котором находится интересующий нас участок криоконсервированной ткани опухоли головного мозга.

Последовательно инкубируйте ткань в уменьшающихся концентрациях этанола. Этанол растворяет проникшую в ткань среду и фиксирует ткань, сохраняя при этом целостность нуклеиновых кислот.

Кроме того, этанол регидратирует ткани, обеспечивая равномерное окрашивание на последующих этапах.

Теперь обработайте ткань Cresyl violet. Крезилфиолетовый - основной краситель - окрашивает кислые клеточные компоненты, такие как нуклеиновые кислоты.

После этого противодействуйте окрашиванию ткани эозином Y. Эозин Y - кислотный краситель - окрашивает основные клеточные компоненты, такие как цитоплазматические белки.

Этот этап дифференциального окрашивания помогает различать цитоплазму и другие клеточные структуры, что позволяет идентифицировать клетки, представляющие интерес.

После окрашивания погрузите ткань в возрастающую концентрацию этанола, чтобы обезвоживать ткань и избежать чрезмерного деформации тканей.

Далее промойте салфетку