Фиксация и окрашивание срезов криоконсервированной ткани: процедура обработки замороженных срезов ткани мозга для лазерной микродиссекции

0 views • 2:41 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Чтобы дифференцировать специфические клеточные популяции в гетерогенной ткани опухоли головного мозга мыши для их последующей изоляции, начните со взятия предметного стекла, на котором находится интересующий нас участок криоконсервированной ткани опухоли головного мозга.

Последовательно инкубируйте ткань в уменьшающихся концентрациях этанола. Этанол растворяет проникшую в ткань среду и фиксирует ткань, сохраняя при этом целостность нуклеиновых кислот.

Кроме того, этанол регидратирует ткани, обеспечивая равномерное окрашивание на последующих этапах.

Теперь обработайте ткань Cresyl violet. Крезилфиолетовый - основной краситель - окрашивает кислые клеточные компоненты, такие как нуклеиновые кислоты.

После этого противодействуйте окрашиванию ткани эозином Y. Эозин Y - кислотный краситель - окрашивает основные клеточные компоненты, такие как цитоплазматические белки.

Этот этап дифференциального окрашивания помогает различать цитоплазму и другие клеточные структуры, что позволяет идентифицировать клетки, представляющие интерес.

После окрашивания погрузите ткань в возрастающую концентрацию этанола, чтобы обезвоживать ткань и избежать чрезмерного деформации тканей.

Далее промойте салфетку ксилолом. Ксилол вытесняет и выводит этанол из тканевого участка.

Наконец, добавьте подходящий монтажный раствор на участок ткани, чтобы сохранить морфологию ткани.

Обработанный участок ткани готов к использованию для лазерной микродиссекции – процесса, который позволяет точно выделить конкретные клетки из ткани.

Погрузите предметные стекла в 30-секундные последовательные нисходящие погружения этанола с последующим окрашиванием кристаллическим фиолетовым раствором на 20 секунд и 5 секунд в 0,5% раствор эозина Y.

В конце инкубации эозина Y используйте фильтровальную бумагу, чтобы промочить предметные стекла насухо и обезвожить предметные стекла в последовательных восходящих погружениях этанола. После 60-секундного погружения этанола промойте предметные стекла в емкости с ксилолом в течение 3 минут.

Затем просушите предметные стекла на поверхности, не содержащей РНКазы, при комнатной температуре в течение 10 секунд перед установкой образцов в монтажную среду, приготовленную из воды, не содержащей РНКазы. Через 10–20 секунд перенесите предметные стекла на платформу микроскопа для микродиссекции.

07:30

Грунтовка для иммуногистохимии Cryosectioned ткани мозга крыс: Пример окрашивания для микроглии и нейронов

Related Videos

0 Views

08:35

Модель культивирования органотипической кусочки глиобластомы человека для изучения миграции опухолевых клеток и специфических для пациента эффектов антиинвазивных препаратов

Related Videos

0 Views

07:58

Свободно плавающее иммуноокрашание мозга мыши

Related Videos

0 Views

28:32

Флэш Замораживание и Cryosectioning E12.5 мозга мыши

Related Videos

0 Views

10:25

Изготовление образцов, Imaging, и анализ протоколов для ножа сканирующей микроскопии

Related Videos

0 Views

02:37

Срез замороженной ткани мозга мыши: процедура получения тонких срезов замороженной ткани из замороженной ткани мозга мыши

Related Videos

0 Views

04:44

Обработка мозга мыши для последующего анализа

Related Videos

0 Views

13:32

Лазерная Capture Microdissection обогащенного популяции нейронов или отдельных нейронов для генного анализа выражения после черепно-мозговой травмы

Related Videos

0 Views

05:51

Интрацеребровентрикулярное и внутрисосудистой инъекции вирусных частиц и флуоресцентных микрогранул в неонатальном мозга

Related Videos

0 Views

09:29

Стереотаксическая Атлас руководствуясь лазерная захватить Microdissection регионов мозга, пострадавших от травмы

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026