Прижизненная визуализация на основе черепных окон на мышиной модели: метод визуализации для изучения поведения предварительно введенных раковых клеток в мозге мышиной модели

Прижизненная визуализация через оптические окна позволяет отслеживать отдельные клетки с высоким разрешением для изучения их поведения в естественной микросреде у живого животного.

Для начала возьмем мышь под наркозом, в мозг которой предварительно введены раковые клетки, а имплантированное черепное окно помещается в металлическое кольцо. Раковые клетки экспрессируют ядерные флуоресцентные белки.

Поместите мышь лицевой стороной вверх в поле визуализации. Магнитный держатель в коробке для визуализации помогает закрепить имплантированное черепное окно.

Теперь перенесите коробку визуализации внутрь камеры визуализации инвертированного микроскопа с контролируемой окружающей средой, чтобы проанализировать поведение раковых клеток в мозге.

В многофотонном режиме настройте лазер на подходящую длину волны. Сосредоточьтесь на опухолевой области, чтобы обнаружить флуоресценцию раковых клеток.

Определите z-стек для каждой позиции, чтобы получить несколько прижизненных изображений раковых клеток в разных оптических плоскостях.

Этот шаг позволяет захватывать значительную долю раковых клеток в опухолевом микроокружении, не влияя на разрешение клеток.

Впоследствии получайте изображения с разных п