Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 3:05 мин. • April 30th, 2023
В ответ на определенные химические аттрактанты, высвобождаемые солидными опухолями, иммунные клетки, такие как опухолеассоциированные макрофаги или ТАМ, проникают в солидные опухоли. Впоследствии эти ТАМ способствуют прогрессированию опухоли.
Чтобы изучить взаимодействие между TAMs и опухолевыми клетками in vitro, начните с использования многолуночного планшета с мембранным вкладышем. Такое расположение временно разделяет колодец на два отсека.
Далее добавляем суспензию ТАМов в верхний отсек трансвелла.
Дополните нижний отсек трансвелла кондиционированной средой, обогащенной химическими аттрактантами, секретируемыми опухолевыми клетками.
Инкубируйте тарелку в течение нужного времени.
Во время инкубации химические модуляторы привлекают ТАМ. Это приводит к перемещению ТАМ в нижний отсек через пористую мембрану-вставку через химически индуцированный хемотаксис.
Теперь извлеките вставку из лунки. Перенесите кондиционированную среду, содержащую миграционную популяцию TAM, в подходящую пластину для флуоресцентного измерения.
Обработайте клетки лизисным буфером, содержащим флуоресцентный краситель. Этот буфер лизирует макрофаги. В конце концов, молекулы красителя связываются с нуклеиновым
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео