Анализ синтеза ДНК: метод оценки синтеза ДНК в пролиферирующих клетках с использованием включения радиоактивного тритиативного тимидина

0 просмотров • 2:54 мин. • April 30th, 2023

Начните с использования многолуночного планшета, содержащего адгезивные клетки.

Обработайте эти клетки средой, содержащей тритиированный тимидин – радиоактивную версию тимидина – и инкубируйте.

Во время инкубации активно реплицирующиеся клетки включают радиоактивный тимидин. Этот тимидин образует пару напротив аденозина, генерируя радиоактивно меченую ДНК в пролиферирующих клетках.

Удалите отработанную среду из лунок. Добавьте буфер для лизиса, чтобы лизировать клетки и выпустить ДНК в суспензию.

Подготовьте сборку комбайна для ячеек, поместив сборные трубки комбайна над лунками микропланшета.

Приложите давление всасывания, чтобы обеспечить аспирацию взвешенной ДНК из лунок. Эта ДНК оседает на фильтровальной бумаге, образуя определенные пятна.

Вырежьте из фильтровальной бумаги чады с пятнами ДНК. Переложите эти чады по отдельности в сцинтилляционные флаконы.

Наложите на фильтровальную бумагу сцинтилляционный коктейль. Поместите флакон в счетчик сцинтилляции жидкости.

Внутри счетчика меченая ДНК излучает энергию за счет радиоактивного распада. Эта энергия поглощается компонентами сцинтилляционного коктейля. В конце концов, компоненты коктейля начинают передавать импульсы, которые, в

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Измерение пролиферации клеток