Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 4:02 мин. • April 30th, 2023
Нейросферы представляют собой неадгезивные сферические агрегаты нейральных клеток-предшественников или NPC.
При осаждении в определенных условиях адгезивного культивирования NPC могут спонтанно мигрировать из нейросферы.
Чтобы оценить миграционную реакцию NPC, сначала приготовьте суспензию NPC желаемой плотности в подходящей среде.
Затем высейте клеточную суспензию в питательную тарелку, содержащую среду, и инкубируйте.
Специфические факторы роста в среде поддерживают пролиферацию клеток. Кроме того, отсутствие подложки для покрытия удерживает клетки во взвешенном состоянии в среде, способствуя формированию трехмерных клеточных агрегатов, называемых нейросферами.
Достигнув нужного размера, соберите нейросферы.
Центрифугируйте и ресуспендируйте гранулу нейросферы в разбавленной среде.
Затем поместите суспензию нейросферы в пластину, покрытую внеклеточным матриксом, содержащую разбавленную среду, и инкубируйте.
Во время культивирования нейросферы прилипают к внеклеточному матриксу.
Со временем, благодаря составляющим внеклеточного матрикса, некоторые NPC начинают мигрировать из ядра нейросферы.
Теперь снимите носитель и зафиксируйте клетки.
Получение фазово-контрастных изображений не
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео