Очистка субпопуляций внеклеточных везикул: методика очистки субпопуляций внеклеточных везикул с помощью ультрацентрифугирования с градиентом плотности
Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 4:27 мин. • April 30th, 2023
Внеклеточные везикулы или ВВ представляют собой наноразмерные, гетерогенные мембраносвязанные везикулы, секретируемые различными клетками, включая опухолевые клетки головного мозга. Малые ВВ представляют собой субпопуляцию, состоящую из эндосомальных и мембранных ВВ.
Чтобы очистить небольшие электромобили, начните с приема предварительно экстрагированных электромобилей, взвешенных в буфере с добавлением сахарозы, который поддерживает однородный раствор и сохраняет структурную целостность электромобилей.
Затем к этому раствору добавьте соответствующий объем йодиксанола - инертной и нетоксичной среды для градиента плотности - для достижения желаемой плотности.
Йодиксанол растворяет загрязняющие белки, которые должны быть удалены позже.
Затем добавьте слои растворов йодиксанола с последовательно уменьшающейся плотностью, чтобы создать прерывистый градиент плотности.
Центрифугируйте пробирку на высокой скорости.
В зависимости от скорости плавучести, более плотные электромобили мигрируют в столь же плотный слой градиентной среды, в то время как менее плотные электромобили мигрируют дальше в более легкий слой, а самые плотные загрязняющие вещества образуют гранулу на дне трубы.
Теперь пе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео