Культура эндотелиальных клеток из микрососудов головного мозга крысы: процедура выделения и культивирования эндотелиальных клеток из микрососудов головного мозга крысы
Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 8:27 мин. • April 30th, 2023
Чтобы изолировать эндотелиальные клетки мозга, сначала перенесите собранный мозг крысы в чашку, содержащую охлажденный буфер
.После удаления мозжечка и зрительных нервов разделите мозг на полушария головного мозга. Затем отделите средний мозг от переднего.
Удалите мозговые оболочки и миелин-содержащее белое вещество из переднего мозга, оставив позади кору головного мозга для изоляции микрососудов.
Затем гомогенизируйте кору головного мозга, чтобы разрушить нервную ткань и составляющие ее компоненты.
Центрифугируйте гомогенат для удаления клеточного мусора и миелина.
Затем обработайте тканевую гранулу коктейлем для пищеварения, содержащим ферменты коллагеназу, диспазу и дезоксирибонуклеазу.
Коллагеназы и диспазы переваривают внеклеточный матрикс, который встраивает микрососуды, отслаивая фрагменты микрососудов от ткани. Дезоксирибонуклеазы разрушают любую свободную ДНК, высвобождаемую из лизированных клеток.
Смешайте желаемый объем разложенного гомогената с соответствующей средой с градиентом плотности и центрифугойте.
Отбросьте миелин и верхний верхний слой, содержащий паренхиматозные клетки мозга, а затем надосадочную жидкость.
Теперь обработайте микрососудистую гранулу коктейлем
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео