Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 7:02 мин. • April 30th, 2023
Гематоэнцефалический барьер, или ГЭБ, представляет собой селективный барьер эндотелиальных клеток и клеток мозга, таких как астроциты, который регулирует транспорт веществ между кровью и мозгом.
Чтобы разработать модель ГЭБ, переверните мембранную вставку на крышку культуральной пластины.
Засейте астроциты над мембраной. Поместите тарелку с культурой на вкладыш и инкубируйте.
Это захватывает астроциты между мембраной и поверхностью лунки.
Переверните пластину, чтобы привести астроциты на дно и добавить подходящую среду в лунку.
Во вставку добавьте эндотелиальные клетки, экспрессирующие оптимальные белки плотных соединений, которые усиливают межклеточные контакты, необходимые для формирования барьера.
Инкубировать, чтобы эндотелиальные клетки могли прилипнуть к мембране.
Извлеките отработанную среду и перенесите вставку в другую хорошо содержащую среду астроцитов, не содержащую фактора роста.
Затем добавьте во вставку среду эндотелиальных клеток, не содержащую фактора роста, и инкубируйте.
Отсутствие факторов роста подавляет деление клеток, сохраняя межклеточные контакты и стабилизируя барьерные свойства.
Эндотелиальные клетки и астроциты взаимодействуют, образуя базальную мембрану
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео