Анализ проницаемости гематоэнцефалического барьера: анализ in vitro для оценки проницаемости мимики ГЭБ к молекулам индикатора

Гематоэнцефалический барьер, или ГЭБ, состоящий из эндотелиальных клеток, перицитов и астроцитов, регулирует приток и отток биологических молекул и помогает поддерживать гомеостаз мозга.

Чтобы оценить проницаемость модели ГЭБ in vitro, начните с модели ГЭБ in vitro, состоящей из адгезивных эндотелиальных клеток на верхней или кровяной стороне пористой мембранной вставки и адгезивных астроцитов на базальной или мозговой стороне мембраны.

Эндотелиальные клетки со своим внеклеточным матриксом контактируют с астроцитами, образуя имитатор ГЭБ.

Перенесите желаемый объем среды из крови и мозга в черную многолуночную пластину для оптимального измерения флуоресценции.

Замените среду со стороны крови на среду, содержащую молекулы флуоресцентных индикаторов с малой молекулярной массой.

В культуре контакты эндотелиально-астроцитарных клеток усиливают клеточный барьер и стабилизируют плотный барьер, ограничивая диффузию молекул индикаторов на мозговую сторону культуры.

Далее соберите подходящие объемы среды из крови и мозга в нужные временные точки. Замените обе стороны носителями, чтобы сохранить объем носителя.

Наконец, используйте многолуночный планшетный ридер для измерения флуоресценции со