MSC Seeded Scaffold Preparation: Методика подготовки каркаса, засеянного мезенхимальными стволовыми клетками, для хирургической имплантации в мышиную модель

Раковые клетки продуцируют хемотаксические факторы хоуминга для привлечения мезенхимальных стволовых клеток или МСК из кровеносных сосудов к месту расположения опухоли.

Чтобы изучить влияние этих клеток на рост опухоли in vitro, начните с взятия стерилизованного каркасного субстрата. Переложите его в лунную пластину, содержащую нужную среду, чтобы предварительно смочить строительные леса. Поместите его на сухую поверхность, чтобы удалить излишки среды, прилипшие к каркасу для лучшей адгезии ячеек. Переложите частично высохший каркас в свежую лунку. Засейте каплю суспензии MSC на строительные леса.

Кроме того, добавьте больше среды в углы лунки, чтобы создать камеру гидратации, предотвращающую испарение среды из капли во время последующей инкубации. Инкубируйте, чтобы МСК прилипли к поверхности каркаса. Переверните леса, чтобы обнажить незасеянную поверхность. Нанесите пипеткой свежую каплю суспензии МСК с этой стороны и дайте МСК прилипнуть.

После того, как МСК прилипнут к обеим сторонам каркаса, накройте его большим количеством среды, убедившись, что все клетки находятся в контакте со средой. Инкубируйте до тех пор, пока МСК не вырастут и не проникнут в щели и поры каркаса. Засеян