Совместное культивирование клеток глиобластомы на структурированных нейронах: метод мониторинга миграции клеток глиобластомы на нейронах гиппокампа крысы in vitro

Глиобластома обладает стволовыми клетками, которые мигрируют по аксональным путям миелинизированных нейронов, чтобы проникнуть в отдаленные участки мозга. Чтобы повторить миграцию клеток глиобластомы или GBM на нейроны in vitro, начните с снятия стеклянного покровного стекла.

Активируйте покровное стекло с помощью кислородной плазмы и загрунтуйте его функционализирующим агентом. Такая обработка обеспечивает легкий доступ к химическим веществам на последующих этапах. Добавьте PEGylated раствор в покровное стекло и инкубируйте. Этот раствор покрывает покровное стекло, предотвращая адгезию нейронов в случайных местах.

Нанесите полимер фотоинициатора на покровное стекло и установите его в камеру визуализации. Поместите камеру на предметный столик флуоресцентного микроскопа. Оказавшись внутри, ультрафиолетовое освещение активирует молекулы фотоинициатора локально в обозначенных областях, соответствующих предполагаемым микроструктурам.

Активированные молекулы фотоинициатора расщепляют нижележащий слой ПЭГ, генерируя желаемый рисунок. Теперь добавьте раствор ламинина и инкубируйте. Ламинин - гликопротеин - откладывается в определенных местах, где был удален слой ПЭГ. Засейте среду, содерж