Выделение церебральных капилляров из мозга человека: оптимизированный метод извлечения церебральных капилляров из ткани мозга человека
Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 6:28 мин. • July 8th, 2025
Церебральные капилляры являются жизненно важным компонентом гематоэнцефалического барьера – полупроницаемого барьера, обеспечивающего избирательное перемещение растворенных веществ между кровью и мозгом. Чтобы изолировать церебральные капилляры, начните со свежей ткани мозга человека. Удалите мозговые оболочки и обрежьте белое вещество.
Измельчите мозговую ткань на более мелкие фрагменты. Перенесите фрагменты в гомогенизатор, содержащий подходящий буфер, и гомогенизируйте. Гомогенизация разрушает ткани, высвобождая капилляры и остатки тканей в раствор.
Перелейте гомогенат в свежую пробирку и добавьте оптимальный объем подходящей среды с градиентом плотности. Центрифугируйте раствор для гранулирования капилляров. Слишком большая или слишком малая среда градиента плотности приводит к низкому выходу капилляров. Удалите надосадочную жидкость.
Ресуспендируйте гранулу в бычьем сывороточном альбумине или буфере с добавлением БСА. БСА стабилизирует пищеварительные ферменты и поддерживает структурную целостность капилляров. Далее отфильтруйте раствор с помощью соответствующего фильтра, чтобы удалить крупные сосуды и остатки тканей.
Затем пропустите фильтрат через фильтр с меньшей сеткой. Эт
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео