Модель периневральной инвазии или ПНИ мышиного седалищного нерва: извлечение и обработка седалищного нерва для понимания инвазии раковых клеток

Раковые клетки могут перемещаться из места своего происхождения и проникать в окружающие нервы в процессе, называемом периневральной инвазией или ПНИ. ПНИ наблюдается на животной модели путем введения раковых клеток в основной нерв, такой как седалищный нерв, который затем извлекается для изучения степени инвазии.

Для начала подготовьте усыпленную мышь, которой ранее ввели раковые клетки в положении лежа. Снимите швы с задней конечности - места инъекции опухолевых клеток, чтобы обнажить седалищный нерв, который иннервирует мышцы задней конечности.

Используйте ножницы, чтобы разделить мышцы и обнажить нижележащий седалищный нерв. Рассеките нервные окончания, чтобы изолировать их от организма. Теперь используйте штангенциркуль для измерения и записи макроскопической степени инвазии раковых клеток.

Затем поместите рассеченный нерв в среду для наращивания, чтобы обеспечить подготовку образца при низких температурах. С помощью микротома криостата отрежьте тонкие срезы вложенного нерва и поместите их на предметное стекло. Окрасьте предметное стекло гистологическим красителем с гематоксилин-эозином.

Гематоксилин - основной краситель - окрашивает кислотные компоненты, такие как ядра, в то