Выделение комменсальных бактерий конъюнктивы на основе мазка: метод выделения комменсальных бактерий из конъюнктивы мышиной модели

Конъюнктива глаза содержит комменсальные бактерии. Эта местная микрофлора защищает глаза от инфекций, активируя иммунные клетки для атаки любых вредных микробов, которые попадают в слизистую оболочку глаз.

Чтобы изолировать комменсальные бактерии, поместите мышь, находящуюся под наркозом, в боковое положение. Возьмите стерильный тампон из глаз, смоченный в подходящей среде. Вставьте влажный кончик тампона в медиальную конъюнктивальную область левого глаза. Надавите на глазное яблоко и перемещайте тампон вперед и назад вдоль конъюнктивы, чтобы собрать разнообразную комменсальную популяцию.

Извлеките тампон и перемешайте его в пробирке, содержащей среду для обогащения микроорганизмов. На этом этапе захваченные бактерии из хлопковой сетки тампона высвобождаются в среду. Выбросьте тампон и инкубируйте трубку, чтобы способствовать началу роста бактерий.

Нанесите несколько капель мазка из глазного тампона с инокулированной обогащенной средой на кровяную агаровую пластину по нужной схеме и инкубируйте. Казеин и пептоны сои, присутствующие в среде, поставляют азот, необходимый для синтеза пептидов, в то время как хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Комменсальные бактерии об