Модель острого билиарного панкреатита: метод создания мышиной модели острого билиарного панкреатита с помощью инфузии протоков поджелудочной железы

Проток поджелудочной железы транспортирует пищеварительные ферменты и соединяется с общим желчным протоком рядом с кишечником. Эти протоки образуют канал, в котором желчные соли активируют пищеварительные ферменты перед выходом в кишечник.

Когда желчные камни закупоривают этот канал, желчь течет назад, активируя пищеварительные ферменты в самой поджелудочной железе, что приводит к острому билиарному панкреатиту – тяжелому воспалительному состоянию. Чтобы имитировать это состояние в модели мыши, подготовьте мышь под наркозом в положении лежа на спине.

Надрез делают в верхней части живота, ниже грудной клетки. Затем подтяните верхнюю часть тонкой кишки поджелудочной железой и зафиксируйте ее боковые концы для доступа к периампулярной области – сложной анатомической структуре, включающей в себя отверстие протока поджелудочной железы.

Закрепите проксимальный и дистальный концы общего желчного протока, чтобы предотвратить утечку в другие органы. Далее подсоедините шприц, наполненный раствором таурохолата натрия, к инфузионному насосу. Таурохолат натрия – это желчная соль, которая активирует ферменты для переваривания жиров.

Теперь введите иглу в периампулярную область и начните перфузию с оптимальной скоростью и концентрацией в течение желаемой продолжительности. После перфузии снять иглу и наложить швы. Поместите кишечник обратно в брюшину.

Зашить разрез. Дайте мыши восстановиться. В конце концов, таурохолат натрия попадает в поджелудочную железу и активирует пищеварительные ферменты, вызывая повреждение поджелудочной железы.

Проверив глубину анестезии с помощью зажима пальца ноги, очистите область живота мыши, находящейся под наркозом, 5% раствором повидон-йода. С помощью триммера удалите волосы между грудью и нижней частью живота, а также очистите хирургическую область площадью около 2 квадратных сантиметров 70% спиртом. Обездвижите животное на хирургической доске и с помощью ножниц разрежьте 5 миллиметров кожи горизонтально на верхней части живота и на 1 сантиметр ниже мечевидного отростка. Повторите разрез на брюшине.

Чтобы выполнить лапаротомию с минимальным обнажением полости, с помощью трактора подтянуть печень к головке примерно на 1 сантиметр от кишечника и локализовать область поджелудочной железы и двенадцатиперстной кишки. С помощью щипцов поднимите печень по направлению к голове животного. Осторожно потянув за часть тонкой кишки, зафиксируйте два боковых конца полипропиленовым швом 6-0 для лучшего обзора дистальной части трубки общего желчного протока.

С помощью зажима для микрососудов временно окклюзируйте проксимальный общий желчный проток. Обнажите орган из брюшной полости. Затем сделайте временную окклюзию дистального общего желчного протока с помощью 8-0 шов. Чтобы получить доступ к общему желчному протоку, проколите периампулярную область, которая выглядит как беловатая часть стенки тонкой кишки, иглой диаметром 0,4 миллиметра, соединенной с полиэтиленовой трубкой диаметром 0,54 миллиметра. Запустите инфузионный насос для инфузии 2,5% раствора таурохолата натрия с постоянной скоростью 10 микролитров на 10 грамм массы тела в течение 3 минут.

После инфузии удалите микрососуд клипсы, временный 8-0 шов, а также инъекционная игла из желчного протока поджелудочной железы. Сшить брюшную полость неабсорбирующим монофиламентным полипропиленовым швом 6-0. Время между лапаротомией и наложением конечного шва не должно быть более 30 минут. После операции животных размещают в полиэтиленовых ящиках, выстланных древесной стружкой, а также водой и едой в неограниченном количестве.