JoVE Encyclopedia of Experiments
Биология
0 просмотров • 4:38 мин • July 8th, 2025
Минимально инвазивная поперечная констрикция аорты или бандажирование дуги аорты — это упрощенная процедура для создания мышиной модели сердечно-сосудистого заболевания. Начните с мыши, находящейся под наркозом, в положении лежа на спине. Побрейте шею и область груди. Выполните разрез по средней линии, чтобы обнажить подлежащий мышечный слой.
Разрежьте мышечный слой, чтобы получить доступ к щитовидной железе и грудине. Затем отделите мышцы трахеи и разрежьте грудину, чтобы открыть нижележащую вилочковую железу. Отделите доли тимуса друг от друга, чтобы открыть поперечную дугу аорты и сонные артерии. Поместите изогнутую иглу под дугу аорты и протолкните ее между стенками сосуда.
Пропустите лигатуру через эту перфорацию и поместите в петлю проставку, чтобы отрегулировать диаметр петли. Теперь затяните шов вокруг аорты, чтобы окклюзировать сосуд. Это увеличивает скорость кровотока в правой сонной артерии, вызывая повышение артериального давления в восходящей аорте и левом желудочке.
После этого снимите распорку и обрежьте резьбу. Затем переместите органы и зашите кожу. Перенесите мышь в клетку для восстановления и следите за ее сердечной функцией. Бандажирование аорты вызывает перегрузку левого желудочка, что приводит к утолщению стенок камеры и уменьшению сердечного выброса.
Перед началом процедуры с помощью иглодержателя изогнут кончики двух-четырех игл 30-го калибра и установите иглы на отдельные ватные аппликаторы. Затем затупите иглу 27 калибра и с помощью иглодержателя согнуть кончик на 90 градусов. Затем разгладьте кончик о твердую поверхность, чтобы получилась 0,4-миллиметровая распорка. После подтверждения соответствующего уровня седативного эффекта отсутствием реакции на защемление пальцев ног нанесите мазь на глаза животного и положите мышь на подогретую при температуре 37 градусов Цельсия грелку в положении лежа на спине.
Закрепите конечности на грелке с помощью хирургической ленты. Затем продезинфицируйте кожу тремя последовательными спиртовыми салфетками и раствором повидон-йода и наложите на животное стерильную простыню с открытым рабочим полем. Чтобы начать процедуру лигирования, с помощью стерильного скальпеля вскройте кожу в положении по средней линии шеи и груди. Далее под препарирующим микроскопом с помощью тупых ножниц аккуратно отделите соединительные ткани и подтяните щитовидную железу к голове.
С помощью изогнутых игл отделите мышечный слой на трахее по средней линии по направлению к обеим сторонам животного и с помощью тупых ножниц разрежьте грудину примерно на 5 миллиметров до второго ребра. Откройте разрез изогнутыми щипцами и с помощью изогнутой иглы отделите доли тимуса и нижнюю грудную стенку. В этот момент будет хорошо видна поперечная дуга аорты и две сонные артерии.
Поместите изогнутую иглу под свод и с помощью кончика сделайте перфорацию между стенкой сосуда и соединительной тканью с другой стороны. С помощью иглы наложите шов мононити 6-0 под дугу аорты и поместите ранее подготовленный спейсер в петлю. Зафиксируйте шов на месте двойным узлом и аккуратно снимите спейсер.
После подтверждения успешного сужения узла разрежьте концы шовной нити и с помощью шелкового шва 6-0 закройте грудную стенку простым прерывистым шовным рисунком, с последующим закрытием кожи монофиламентным швом 6-0 в непрерывном шовном узоре. Затем нанесите раствор повидон-йода на место наложения швов и поместите животное в предварительно утепленную клетку для восстановления и послеоперационного контроля.