Забор неповрежденных яичников у мыши: хирургическая процедура для выделения полного яичника от мышиной модели

Начните с самки мыши, находящейся под наркозом, в правильном боковом положении на хирургической платформе. Далее побрейте живот мыши и простерилизуйте эту область. Сделайте паралюмбальный разрез кожи и рассеките мышцы живота, чтобы обнажить брюшную полость.

Теперь найдите один из жировых пакетов яичников - жировую ткань, окружающую яичники. Яйцеводы соединяют яичники с длинными трубчатыми структурами, называемыми маточные рога. Кроме того, аккуратно выведите яичник наружу вместе с яичниковым жировым пакетом, поместив его на влажную марлю, чтобы сохранить ткань увлажненной.

Теперь определите яичниковую сумсу - тонкую мембрану, заключающую в себе яичник и конец яйцевода. Надрежьте бурсу напротив воротника яичника, который образует границу между яичником и связкой яичника. Связка яичника структурно соединяет яичник с маточным рогом.

Обнажив яичник, аккуратно удалите его из яичниковой сумки и зажмите у ворот яичника, чтобы иссечь яичник. Переложите вырезанную завязь в культуральную тарелку, содержащую охлажденный физиологический раствор.

Храните неповрежденный яичник мыши, состоящий из функциональных единиц – фолликулов яичников, каждый из которых содержит ооцит, до дальнейшего использования.

Перед началом процедуры подтвердите соответствующий уровень седативного эффекта ущипыванием пальца ноги, и нанесите мазь на глаза животного. Поместите мышь в лежачем положении на стопке нагретых бумажных полотенец и, начиная чуть ниже ребер и двигаясь дистально, используйте машинки для стрижки волос с 40 лезвиями, чтобы удалить квадрат волос размером от 2 до 3 сантиметров на несколько миллиметров латеральнее средней линии с каждой стороны животного, с полосой волос от 1 до 2 2 сантиметров, покрывающей среднюю линию.

После введения анальгезии перенесите животное на нагретое стерильное операционное поле в положении лежа на спине и используйте кусок марли, пропитанной 70% этанолом, размером 2 на 2 сантиметра, а затем используйте скраб бетадина для дезинфекции хирургической области. Далее сделайте парапоясничный разрез размером от 1 до 1,5 сантиметра в одной из операционных областей, а двумя ножницами для тупого разрезания кожи от подлежащей фасции.

Затем сделайте еще один разрез через фасцию, и тупым образом рассекайте латерально под фасцией как можно поверхностнее, пока не будет достигнута брюшная полость. Наложите на разрез марлевую хирургическую простыню размером 2 на 2 сантиметра и смочите марлю стерильным физиологическим раствором.

С помощью небольших щипцов найдите жировую ткань, которая окружает яичник, и аккуратно извлеките жировой пакет и яичник на простыню. Яичниковый жировой пакет будет казаться белее, чем окружающая жировая ткань. Поместите 1,5-дюймовый зажим Bulldog на жировую подушку, стараясь не закупоривать яичниковую сумку, чтобы удержать тракт на месте во время процедуры.

Используйте препарирующий микроскоп, чтобы определить яичниковую сумку. Затем возьмитесь за бурсу двумя часовыми щипцами и надрежьте бурсу на противоположной стороне от ворот яичника, чтобы обнажить яичник.

Прежде чем решить, где разорвать бурсу, попробуйте визуализировать карман в бурсе, куда вы поместите новый яичник перед наложением швов. Открывайте бурсу только настолько, насколько это необходимо, чтобы удалить эндогенный яичник.

Аккуратно удалите яичник из бурсы и зажмите ворота яичника с помощью щипцов часовщика, чтобы иссечь яичник и предотвратить кровотечение. Затем поместите донорский яичник в стакан часов, содержащий стерильный физиологический раствор при температуре 4 градуса Цельсия, и накройте стекло неплотной крышкой.