Прижизненная визуализация: метод наблюдения на клеточном уровне за поджелудочной железой мыши через стабилизированное окно визуализации

Прижизненная визуализация включает в себя визуализацию клеток живого животного через окно визуализации, имплантированное в животное. Это позволяет в течение длительного времени наблюдать за динамикой клеток без ущерба для их функций.

Для начала возьмем трансгенную мышь под наркозом, предварительно имплантированную с окном для визуализации поджелудочной железы, опирающимся на металлическую пластину. Опорная пластина пространственно отделяет поджелудочную железу от кишечника, тем самым уменьшая артефакты движения от физиологических движений, таких как перистальтика.

Трансгенная мышь экспрессирует зеленый флуоресцентный белок или GFP под действием промотора гена инсулина, экспрессируемого в бета-клетках островков поджелудочной железы.

Затем крепко держите мышиный хвост и распылите дезинфицирующее средство, чтобы удалить любые поверхностные загрязнения. Введите катетер в боковую хвостовую вену. Введите в хвостовую вену раствор, содержащий антитела, помеченные красным флуоресцентным зондом. Эти антитела связываются с клетками, выстилающими кровеносные сосуды, окрашивая их в красный цвет.

Теперь переведите мышь в режим прижизненной микроскопии. Вставьте окно для визуализации поджелудочно