Модель антеградной перфузии: техника ex vivo для перфузии изолированного сердца мыши

Начните с того, что поместите мышь под наркозом в положение лежа на спине. Рассеките грудную полость, чтобы визуализировать сердце. Используйте пипетку с широким отверстием для приложения давления всасывания и аспирации сердца от тела мыши к кончику. Удалите сердце в аорте, чтобы извлечь его из тела мыши.

Погрузите изолированное сердце в стакан, содержащий богатый питательными веществами буфер с антикоагулянтом. Антикоагулянт в буфере образует комплекс с кальцием, присутствующим в кардиомиоцитах – клетках сердечной мышцы, прекращая сокращение сердечной мышцы и препятствуя свертыванию крови.

Затем положите верхушку сердца вниз на подставку для сердца, которая находится в чашке Петри, содержащей подходящий буфер. Зажмите аорту над предсердиями и перенесите зажатое сердце на перфузионную пластину.

Затем возьмите шприц-иглу в сборе, содержащую соответствующий перфузионный буфер. Введите иглу в левый желудочек, прокалывающий камеру желудочка.

Когда аорта зажата, внутрижелудочковая инъекция создает давление в аортальных клапанах, чтобы они открылись. Следовательно, буфер промывает кровь антеградно через коронарные артерии, тщательно перфузируя сердечные мышцы. Наконец, буфер изливается ч