Апикальная резекция неонатальной мышиной модели: хирургическая процедура ампутации верхушки желудочка для изучения регенеративного потенциала в сердце новорожденной мыши

Апикальная резекция неонатальной мыши – это процедура по удалению верхушки левого желудочка сердца. В результате повреждения активируются неонатальные сердечные макрофаги, которые способствуют клеточным процессам для восстановления сердца. Однако эта регенеративная способность ограничивается во взрослом возрасте, что приводит к сердечной недостаточности. Трансплантация неонатальных сердечных макрофагов во взрослое сердце может восстановить сердечную функцию.

Для начала поместите новорожденную мышь на лед, чтобы вызвать гипотермию, которая вызывает онемение мыши. Перенесите и подготовьте мышь, находящуюся без сознания, на хирургическую платформу. Теперь под стереоскопом горизонтально надрежьте левую сторону грудной клетки и отделите нижележащие мышцы, чтобы визуализировать сердце.

Надавите на грудную клетку и брюшную полость, чтобы вывести сердце наружу. Осторожно отрежьте верхнюю ткань желудочка до тех пор, пока кровотечение не обнажит камеру левого желудочка. С помощью ватного тампона вдавите сердце обратно в грудную полость. Зашить надрезанную грудную стенку. Нанести тканевый клей для соединения кожи. Впоследствии переложите мышь на нагревательное одеяло, чтобы остановить переохлаждение. Затем переместите прооперированную новорожденную мышь в клетку матери для скорейшего выздоровления.

После апикальной резекции резидентные сердечные макрофаги накапливаются в поврежденном месте. Впоследствии эти макрофаги могут быть выделены для трансплантации во взрослое сердце.

Начните с предварительного охлаждения бронзовой рабочей платформы в течение ночи при температуре минус 20 градусов Цельсия. Достаньте мышь под наркозом из холодильника и положите ее на платформу. Закрепите мышь в лежачем положении с помощью медицинской клейкой ленты. Поместите операционную платформу с мышью под стереоскоп и продезинфицируйте мышиную коробку с помощью подготовительной подушки, смоченной бетадином и 70% спиртом.

Надрежьте кожу разрезом в 1 сантиметр в четвертом межреберье грудной полости, а межреберные мышцы отделите с помощью микрохирургических ножниц до тех пор, пока не будет получен доступ к сердцу. Поочередно надавливайте на грудную клетку и живот с помощью двух щипцов до тех пор, пока сердце не выйдет из груди, без каких-либо механических повреждений.

Установите ребра ниже и выше небольшого разреза в качестве естественной фиксации для обездвиживания сердца. Найдите верхушку левого желудочка и разрежьте ткань верхушки желудочка диаметром 1 миллиметр с помощью иридэктомических ножниц. Подтвердите, что левая желудочковая камера обнажена и начинает сочиться.

Аккуратно вдавите сердце обратно в грудную полость с помощью ватного тампона. Сшиваем мышцы, ребра и кожу с помощью 8-0 Пролина накладывает швы, а мышь тщательно очищает после операции. Перенесите мышь с операционной платформы на 37-градусный нагревательный одеяло, чтобы согреть тело сразу после операции.

Подтвердите анабиоз мыши, наблюдая за признаками восстановления спонтанного дыхания, изменением цвета кожи с бледного на розовый, а также движением конечностей. Отнесите прооперированную мышь обратно к матери, как только она восстановится. При необходимости смешайте прооперированную мышь и материалы для гнезда ее матери.