JoVE Encyclopedia of Experiments
Биология
0 просмотров • 2:22 мин • July 8th, 2025
Средняя мозговая артерия, или M-C-A, является важным сосудом головного мозга, который снабжает мозг насыщенной кислородом кровью.
Чтобы измерить кровоток в MCA, поместите мышь под наркозом в положение лежа. Сделайте небольшой разрез на волосистой части головы между левым ухом и левым глазом, чтобы найти височную кость черепа. Разрежьте соседние мышечные слои и втяните их, чтобы визуализировать MCA под костью черепа.
Расположите держатель щупа, содержащий лазерный доплеровский щуп, над MCA. Этот шаг позволяет имплантировать зонд близко к артерии. Нанесите хирургический клей, чтобы зафиксировать зонд в его положении. Используя больше клея, закройте кожу вокруг имплантированного зонда и закройте место раны.
Подключите щуп к лазерному доплеровскому устройству. Зонд фокусирует лазерный луч с определенной частотой на узкой области MCA. Впоследствии красные кровяные тельца, протекающие в артерии, поглощают лазерный луч.
Находясь в движении, эти клетки рассеивают лазер, вызывая доплеровский сдвиг — видимое изменение частоты излучаемых волн. Детектор фиксирует эти мельчайшие сдвиги частоты для измерения кровотока в артерии.
Подготовьте держатель для лазерного доплеровского зонда, отрезав кончик наконечника пипетки объемом 10 микролитров. Как только мышь будет полностью обезболива, поместите ее в положение лежа в зоне операции. Аккуратно введите ректальный зонд, чтобы контролировать температуру на протяжении всей хирургической процедуры. После дезинфекции места операции разрежьте кожу головы между левым ухом и глазом, чтобы обнажить кость черепа.
Затем разрежьте и удалите височную мышцу, чтобы визуализировать множественные мозговые артерии или MCA под черепом. Зафиксируйте внешнюю часть наконечника, держа лазерный допплеровский зонд или волокно поверх левого МКА с помощью клея, и закройте кожу так, чтобы кожа также была склеена. Нанесите две-три капли отвердителя клея, чтобы ускорить процесс. Убедитесь, что лазерное доплеровское волокно не приклеено и в любой момент может быть легко снято с держателя наконечника.