Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 3:56 мин. • July 8th, 2025
Поместите беременную мышь под наркозом желаемого срока беременности в положение лежа на спине. Простерилизуйте область живота. Проведите лапаротомию — хирургический разрез брюшной стенки. Рассеките мышцы живота, чтобы обнажить брюшную полость.
Определите рога матки — длинные трубчатые структуры, в которых размещается несколько плодов, что позволяет им развиваться одновременно. Аккуратно выведите наружу рога матки из брюшной полости, расположив их в поперечной ориентации. Далее визуализируйте шейку эмбриона мыши-кандидата.
Аккуратно введите хирургическую иглу со швом соответствующей толщины поперечно через область маточного рога, в сторону от плаценты. Продвигайте иглу дальше к передней части шеи, где находится трахея. Направьте иглу на выход из шейки напротив маточного рога. Тщательно затяните шов, чтобы окклюзировать трахею, обеспечив целостность стенки матки. Вернуть рога матки в брюшную полость.
Введите теплый физиологический раствор в брюшную полость, чтобы облегчить протекание беременности. Закройте хирургический разрез и дайте мышке восстановиться. Разработанная модель окклюзии трахеи плода мыши может быть использована для изучения влияния окклюзии трахеи на развитие легких.
Очистите брюшную поверхность спиртом и повидон-йодом, и поддерживайте стерильные условия на протяжении всей операции. Выполните вертикальный разрез для лапаротомии беременных матерей, и разрежьте все слои отдельно. Определите рога матки с каждой стороны и определите плоды-кандидаты для операции.
Оперировать по два плода в каждом маточном роге, если с каждой стороны четное количество плодов, и по одному плоду в каждом маточном роге, если нечетное число. Используя для визуализации стекла с 2-кратным увеличением, расположите маточный рог поперечно. Расположите щенков лицом вверх между двумя пальцами, используя глаза и хвост в качестве ориентира.
Слегка надавите на голову щенка, чтобы позволить вытянуть голову и визуализировать шею. Выполните окклюзию трахеи, или ТО, с помощью атравматичной иглы и полипропиленового шва 6-0. Держите плаценту сбоку и вдали от точек входа и выхода иглы.
Вводите иглу поперечно через боковую часть матки, в сторону от плаценты, через одну треть передней части шейки. Затем осторожно переместите иглу к средней линии шеи. Направьте его на переднюю часть, затем выйдите из шейки между трахеей и напротив сонной артерии, влагалища и матки.
Завяжите шов узлом, заботясь о сохранении целостности оболочек и стенки матки. Замените маточный рог в брюшной полости и перед закрытием введите 2 миллилитра теплого стерильного физиологического раствора в брюшную полость.
Наложите бегущий полиглактиновый шов 5-0, чтобы закрыть брюшную стенку, и закройте кожу небегущим шелковым швом. Внесите 0,1 мг/кг бупренорфина внутрибрюшинно для обезболивания и дайте матери восстановиться в теплом инкубаторе. Обратите внимание на то, что прооперированное животное может питаться самостоятельно и содержать его в своей индивидуальной клетке.