Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 3:39 мин. • July 8th, 2025
При патологических состояниях колоноскопия позволяет визуализировать удаление толстой кишки и тканей с помощью щипковой биопсии для детального анализа воспалительных ран.
Чтобы выполнить колоноскопическую щипковую биопсию у мышей, начните с биопсийного сбора. В сборе находится соединительный узел, тубус эндоскопа с предварительно вставленным колоноскопом оптимального диаметра. Колоноскоп подключается к источнику света, источнику видеосигнала, газовому порту и порту инструмента для биопсийных щипцов.
Далее подготовьте мышь под наркозом в положении лежа на платформе для колоноскопии. Потяните хвост вверх и с помощью иглы для зонда наполните анус подходящим буфером для вымывания любых фекалий. Затем введите колоноскоп в анальное отверстие и продвигайте его в прямую кишку. Продолжайте перемещать колоноскоп дальше к толстой кишке, одновременно нагнетая газ, чтобы толстая кишка оставалась надутой.
Затем выведите щипцы из порта инструмента и откройте губки. Поверните щипцы под прямым углом, чтобы получить рану оптимальной глубины. Слишком неглубокие или слишком глубокие раны приводят к поверхностной ране или перфорации толстой кишки соответственно. После этого с помощью биопсийных щипцов отщипывают ткань толстой кишки. Извлеченная ткань и индуцированная рана могут быть дополнительно проанализированы для понимания патофизиологии.
Перед началом процедуры вставьте эндоскоп с жестким отверстием диаметром 1,9 мм в оболочку эндоскопа и прикрепите собранный эндоскоп к источнику света и устройству видеовизуализации в соответствии с инструкциями производителя. С помощью прилагаемой трубки прикрепите воздушный насос к газовому клапану с левой стороны оболочки, рядом с рабочим каналом.
Убедитесь, что рабочий канал находится в открытом положении, и введите 3 Fr биопсийных щипца через рабочий канал. Продвигайте щипцы до конца ножна, не выступая из ножен.
Затем поместите мышь, находящуюся под наркозом, на эндоскопическую платформу с вентральной стороны и подтвердите соответствующий уровень седативного эффекта по отсутствию реакции на педальный рефлекс. После нанесения глазной мази наполните 3-миллилитровый шприц с прикрепленной крысиной иглой комнатной температуры PBS, и введите иглу примерно на 1 сантиметр в анальное отверстие мыши. Аккуратно настаивайте PBS до тех пор, пока фекальный материал не будет очищен. Несколько фекальных гранул должны выйти из мыши вместе с ПБС, которая была введена.
Введите собранный эндоскоп на 0,5 сантиметра в анальное отверстие и продвигайте биопсийные щипцы в очищенный просвет прямой кишки до тех пор, пока полные «челюсти» щипцов не окажутся за пределами конца тубуса. Поверните щипцы на 90 градусов так, чтобы челюсти открылись в ориентации восток-запад, и откройте кончики и продвинуте щипцы примерно на 1 сантиметр, закрывая и втягивая щипцы одним плавным быстрым движением, чтобы собрать биопсию. Чтобы избежать полной инсуффляции толстой кишки во время проведения биопсии, оставьте правую сторону газового клапана открытой.