JoVE Encyclopedia of Experiments
Биология
0 просмотров • 3:24 мин • July 8th, 2025
При эпилепсии внезапный всплеск электрической активности в мозге приводит к неврологическим и кардиореспираторным аномалиям. К таким аномалиям относятся судороги – аномальные электрические сигналы в головном мозге, аритмия – нерегулярное сердцебиение, и апноэ – преходящее прекращение дыхания, которые можно оценить с помощью мультисистемного метода мониторинга.
Чтобы выполнить мультисистемный мониторинг на животной модели, начните со скованного кролика с предварительно имплантированными электроэнцефалограммой, или ЭЭГ, и электрокардиограммой, или ЭКГ, электродами. Электроды ЭЭГ и ЭКГ помогают контролировать активность мозга и сердечный ритм в режиме реального времени соответственно. Затем прикрепите оксиметр над правым ухом кролика и капнограф над носом и ртом кролика для записи параметров дыхания.
Побрейте заднюю поверхность левого уха кролика, чтобы визуализировать краевую ушную вену. Протрите ухо антисептиком, чтобы простерилизовать поверхность и расширить вену. Затем вставьте канюлю в ушную вену и закрепите ее. Подключите канюлю к перфузионной системе, содержащей реагент, вызывающий судороги. Теперь введите желаемую концентрацию реагента в вену кролика и дайте ему распространиться дальше в мозг.
Молекулы, вызывающие судороги, связываются с антагонист-модулирующим сайтом гамма-аминомасляной кислоты, или рецепторами ГАМК, вызывая длительную деполяризацию нейронов. После этого периодически увеличивайте дозу и тщательно контролируйте параметры, чтобы добиться визуальных признаков эпилептических отклонений.
Перед регистрацией реакции ЭЭГ-ЭКГ на внутривенное введение лекарств побрейте заднюю поверхность уха кролика и используйте 70% этанол для дезинфекции участка и расширения краевой ушной вены. Осторожно канюлируйте краевую ушную вену с помощью ангиокатетера 25-го калибра и поместите инъекционную пробку на конец катетера. Прикрепите к уху шину, созданную из трех свернутых в рулон кусков марли, чтобы закрепить катетер на месте и удерживать ухо в вертикальном положении. Введите 1 миллилитр 10 единиц USP на мл гепаринизированного физиологического раствора, чтобы сохранить патент на катетер.
По окончании исходной регистрации вводите в катетер физиологический раствор в дозе от 1 до 10 мг/кг интересующего препарата один раз в 10 минут. После каждой дозы тщательно контролируйте видео--ЭЭГ-капнографию-оксиметрию на предмет любых нейро-кардиологических, электрических и дыхательных аномалий, а также визуальных признаков эпилептиформной активности. Отмечайте эти изменения в режиме реального времени, а также во время постанализа.