Изоляция корнеосклеральной пуговицы: хирургическая процедура получения корнеосклеральной пуговицы из глаза свиньи

Передняя часть глаза покрыта роговицей – прозрачным слоем, позволяющим пропускать световые лучи. Роговица переходит в склеру – белую защитную ткань вокруг глаза. Часть глаза, состоящая из роговицы, окруженной тонким кольцом склеры, является корнеосклеральной пуговицей.

Чтобы вырезать корнеосклеральную пуговицу, поместите неповрежденный свиной глаз на чашку Петри. Удалите конъюнктиву - слизистую оболочку вокруг склеры - вместе с окружающими экстраокулярными мышцами, чтобы получить доступ к склеральной оболочке. Обработайте глаз подходящим дезинфицирующим раствором, чтобы удалить любые загрязняющие микроорганизмы с поверхности глаза.

Смойте дезинфицирующее средство буферным раствором. Перенесите продезинфицированный глаз в посуду для свежей культуры. Сделайте разрез на склере рядом с границей роговицы. Используя это отверстие, сделайте полный круговой разрез, чтобы разделить глаз на два фрагмента.

Визуализируйте внутреннюю сторону лобного сегмента, чтобы найти увеальную шерсть, прикрепленную к склере. Эта ткань состоит из пигментированной радужной оболочки, кольцеобразного цилиарного тела и части сосудистого слоя сосудистой оболочки. Отделите язычок, чтобы визуализировать корнеосклеральный слой. Храните пуговицу в стерильном буферном растворе для дальнейших анализов.

С помощью стерильных щипцов перенесите глазное яблоко в чашку Петри. Удалите конъюнктиву и мышечную ткань вокруг глазного яблока с помощью лезвия скальпеля #15 и щипцов. Затем, удерживая зрительный нерв щипцами, аккуратно приподнимите глазное яблоко, и переложите его в пол-литровую банку, наполненную стерильным ПБС.

Как только все глазные яблоки будут очищены от окружающих тканей, с помощью стерильных щипцов переместите их в другую пол-литровую банку, наполненную 3% повидон-йодом в PBS. После того, как глазные яблоки пролежали в банке одну минуту, переложите их в третью банку, содержащую стерильный PBS.

Поместите глазное яблоко на чистую чашку Петри и с помощью щипцов удерживайте его устойчиво. Лезвием скальпеля #10A сделайте надрез возле роговицы. С помощью ножниц иссекайте роговицу, оставляя вокруг нее около 3 миллиметров склеры. Следите за тем, чтобы острый конец ножниц находился в надхориоидальном пространстве и не прокалывал радужную оболочку.

Удерживайте корнеосклеральную кнопку щипцами и используйте еще одну пару щипцов с заостренными концами, чтобы аккуратно отделить ткань увеальной ткани. Затем поднимите корнеосклеральную кнопку, чтобы отделить ее от остальной части глазного яблока. Кратковременно промойте пуговицу в 1,5% растворе повидон-йода в ПБС. Затем поместите кнопку в стерильную PBS в 12-луночный планшет.