JoVE Encyclopedia of Experiments
Биология
0 просмотров • 3:03 мин • July 8th, 2025
У свиней многолопастные легкие - парный орган дыхания - окружают сердце в грудной полости. Трахея обеспечивает прохождение воздуха в легкие и из них. Он разветвляется на два основных дыхательных пути или бронхов, ведущих к легким.
В легких бронхи делятся на все более мелкие дыхательные пути, а самые маленькие концевые ветви дыхательных путей называются бронхиолами. Бронхиолы ведут к крошечным воздушным мешкам в форме шара, называемым альвеолами, которые являются местами газообмена в легких.
Чтобы изолировать срезы бронхиоловой ткани, начните с помещения свежесобранных легких свиньи на стерильную платформу. Термическая стерилизация вентральной поверхности плевры - тонкой мембранной структуры, выстилающей легкие, - для устранения поверхностных загрязнений из тканей. Этот этап также способствует легкому разрезу плевры на последующих этапах.
Разрежьте по длине легкого, а также иссеките окружающие ткани, чтобы обнажить хрящ бронха. Далее сделайте поперечный разрез в самой высокой точке бронха, чтобы отделить его от трахеи.
Придерживая свободный конец бронха, аккуратно отделите длину бронха с бронхиолами от окружающей альвеолярной ткани. Иссеченный бронхиолярный срез промойте подходящим средом. Участок бронхиоларной ткани готов к дальнейшим экспериментам.
Получают легкие сразу после убоя и транспортируют их в лабораторию в бытовом холодильном боксе. Работают на стерилизованной поверхности и под пламенем. Поместите легкие на чистую пластиковую разделочную доску, покрытую автоклавной алюминиевой фольгой, и проверьте, чтобы бронхиолы остались неповрежденными. Легкие не пригодны для использования, если на скотобойне или во время транспортировки были какие-либо повреждения.
Нагрейте мастихин под пламенем, и очень кратковременно прикоснитесь ножом к области легкого, окружающей бронхиолу, чтобы простерилизовать поверхность ткани. Отрежьте поверхностную ткань вокруг бронхиолы с помощью стерильного бритвенного лезвия, делая надрезы параллельно бронхиоле, чтобы предотвратить повреждение.
После того, как бронхиола будет обнажена, сделайте поперечный разрез через бронхиолу в самой высокой видимой точке. С помощью стерильных щипцов слегка возьмитесь за свободный конец бронхиолы и отрежьте остатки ненужной ткани с помощью стерильного бритвенного лезвия. Сделайте окончательный поперечный разрез поперек бронхиолы, прежде чем станет видно какое-либо разветвление, чтобы удалить бронхиолу из легких.
В данной статье подробно описывается анатомическое строение легких свиньи и приводится протокол выделения срезов тканей бронхиол. Данная методика обеспечивает сохранность структуры ткани для дальнейших экспериментов.
Надежное выделение интактной ткани бронхиол из легких свиньи позволяет создавать физиологически релевантные модели инфекции ex vivo для разработки респираторных лекарственных препаратов. Эта возможность способствует валидации мишеней на ранних стадиях и снижению механистических рисков в исследованиях хронических инфекций легких, особенно при изучении таких патогенов, как Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus. Стандартизированная подготовка тканей повышает прогностическую достоверность и трансляционную преемственность в рамках доклинических рабочих процессов.
Данный протокол экстракции тканей находится на стыке этапов первичного поиска и разработки доклинических моделей, обеспечивая создание надежных моделей инфекции для последующего скрининга и трансляционных исследований.
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Похожие видео
0 Просмотры
Последнее обновление: 29 августа 2026