Витрификация эмбрионов кроликов с использованием криогенной соломы: метод сверхбыстрого охлаждения для сохранения эмбрионов кроликов для долгосрочного хранения

0 просмотров3:15 мин • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Витрификация эмбрионов — это метод сверхбыстрой криоконсервации, который охлаждает эмбрионы с чрезвычайно высокой скоростью до сверхнизких температур, способствуя их долгосрочному хранению.

Для начала возьмите заготовленные эмбрионы кролика в подходящую среду. Инкубируют эмбрионы с уравновешивающим раствором, содержащим низкие концентрации проникающих в клетки криопротекторов - этиленгликоля, или ЭГ, и диметилсульфоксида, или ДМСО. EG и ДМСО диффундируют через клеточные мембраны, замещая молекулы воды внутри клеток и предотвращая внутриклеточное образование кристаллов льда.

Затем инкубируйте эмбрионы с раствором для витрификации, содержащим более высокие концентрации EG и ДМСО, чтобы обеспечить адекватное проникновение криопротекторов и достаточный внутриклеточный отток воды, защищающий клетки от повреждения замораживанием.

Соедините стерильный криогенный держатель для соломинок с микродозатором. С помощью микродозатора заполните соломинку нужным материалом до нужного уровня. Затем аспирируют пузырь воздуха, за которым следует минимальный объем раствора для витрификации, содержащего эмбрион, и еще один пузырь воздуха.

Снова отсаживайте фильтрующий материал до тех пор, пока первая фракция не намокнет и не полимеризует ватную пробку с порошковым покрытием, запечатывая конец соломинки. Другой конец закройте гидрофобной соломинкой. Воздушные и срединные сегменты помогают изолировать эмбрионы внутри закрытого носителя.

Кратковременно погрузите соломинку в жидкий азот при температуре -196°C. Носитель обеспечивает высокую скорость охлаждения, затвердевая эмбрионы в стекловидную аморфную фазу, в то время как малый объем раствора витрификации и используемых криопротекторов смягчает осмотический стресс. Витрифицированные эмбрионы, при этом метаболическая активность приостановлена, могут храниться до использования.

Для витрификации эмбрионов следует погрузить эмбрионы в уравновешивающий раствор на 2 минуты, после чего следует 1-минутная инкубация в растворе для витрификации. В конце инкубации загрузите эмбрионы в пластиковую мини-трубочку объемом 125 микролитров и соедините закрытый конец соломинки с подходящим микродозатором объемом 1 миллилитров. Отсадите основание на середину до одной трети длины соломинки, за которым следует небольшой пузырь воздуха.

Затем с помощью стереомикроскопа отсасывайте эмбрионы в 40 микролитрах раствора для витрификации, а затем добавьте еще один небольшой пузырь воздуха в щелочной среде, достаточной для перемещения первой жидкой фракции вверх к хлопковому концу министроу. Затем закройте открытый конец министропы пробкой-соломинкой, погрузите министрогу непосредственно в жидкий азот для достижения остеклования и храните министроу в дьюаре с жидким азотом.

09:35

Модифицированный MicroSecure Витрификация: Безопасный, простой и очень эффективная процедура криоконсервации для человека бластоцисты

Похожие видео

0 Просмотры

10:59

Биопсия и витрификация человека

Похожие видео

0 Просмотры

06:53

Витрификация зрелых ооцитов in vitro, собранных у взрослых и препубертатных яичников у овец

Похожие видео

0 Просмотры

13:36

Сбор и Криоконсервация ооцитов хомяка и мыши Эмбрионы

Похожие видео

0 Просмотры

11:10

Криоконсервация Предимплантационная Эмбрионы крупного рогатого скота, овец и коз

Похожие видео

0 Просмотры

06:00

Криоконсервация эмбрионов мыши на этиленгликоля основе Витрификация

Похожие видео

0 Просмотры

07:06

Мышь Криоконсервация спермы и восстановление использованием I · Cryo Kit

Похожие видео

0 Просмотры

04:24

Криоконсервация на основе витрификации: метод сверхбыстрого охлаждения для сохранения биологических образцов при очень низких температурах для долгосрочного хранения

Похожие видео

0 Просмотры

02:31

Размораживание эмбрионов кроликов: процедура согревания для восстановления криоконсервированных эмбрионов кроликов для переноса эмбрионов

Похожие видео

0 Просмотры

13:32

Криоконсервация данио рерио сперматогонии всего яички иглой погружен ультра-быстрое охлаждение

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 15 августа 2026