Гидродинамическая доставка генов: метод экстрагенной ДНК in vivo в гепатоцитах мышей путем инъекции в хвостовую вену

Чтобы выполнить гидродинамический перенос генов, начните с использования шприца, наполненного раствором на основе физиологического раствора, содержащим рекомбинантные плазмиды, несущие интересующий ген. Затем возьмите мышиную модель и быстро введите большой объем раствора плазмиды у основания хвоста, обеспечивая внутривенное введение раствора плазмиды в хвостовую вену.

Инъекция большого объема плазмид под давлением создает механическую силу, называемую гидродинамической силой, которая увеличивает внутрисосудистое давление в нижней полой вене - вене, которая несет дезоксигенированную кровь к сердцу.

Большой объем жидкости вызывает застойные явления в правом желудочке сердца, что приводит к изменению направления крови. На этом этапе раствор плазмиды попадает в печеночную вену, которая переносит его в печень.

Плазмиды перемещаются внутри печеночных синусоид — пространств в печени, выстланных эндотелиальными клетками. Увеличенный объем крови помогает плазмидам проникать в эндотелиальный слой, помогая им достигать окружающих гепатоцитов – клеток печени.

Быстрый приток плазмидного раствора вызывает давление на клеточную мембрану гепатоцитов, порождая переходные поры. Эти поры облегчают п