Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:31 мин. • July 8th, 2025
Лазерная доставка лентивирусных генов — это метод переноса трансгена в систему хозяина.
Чтобы получить трансгенных мышей, начните с выделения оплодотворенных мышью яйцеклеток в подходящей питательной среде. Поместите оплодотворенную яйцесодержащую культуральную чашку на предметный столик микроскопа, предварительно установленный лазерным аппаратом и подключенный к управляющему программному обеспечению. Наблюдайте при подходящем увеличении.
Оплодотворенные яйца окружены zona pellucida, защитным слоем гликопротеина, который блокирует лентивирусные частицы. Чтобы проникнуть через этот барьер, включите лазерный аппарат и убедитесь, что лазерный светодиод виден над прозрачной зоной. С помощью управляющего программного обеспечения выстрелите лазером. Отрегулируйте продолжительность обжига в соответствии с желаемым диаметром перфорации.
Поместите яйца в инкубатор для восстановления. После короткой инкубации удалите яйца и добавьте частицы лентивируса, несущие интересующий ген и флуоресцентный селективный маркер.
При перфорации zona pellucida лентивирус легко диффундирует к мембране яйцеклетки и проникает через эндоцитоз. Лентивирус распадается, высвобождая свою РНК, которая при последовате
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео