Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:50 мин. • July 8th, 2025
Для негативного окрашивания оболочечных вирусов начните с нужной вирусной суспензии. Инкубируйте вирусы с глутаральдегидом, химическим фиксатором. При проникновении глутаральдегид сшивает вирусные белки и нуклеиновые кислоты, инактивируя вирусы, сохраняя при этом морфологию, тем самым способствуя безопасному обращению с вирусами. Переложите эту смесь в многолуночную пластину.
Прикрепите просвечивающие электронные микроскопы, ПЭМ, сетки, содержащие капсулу, к пипетке через соединитель. С помощью пипетки аспирируйте вирусфиксирующую смесь в капсулу. Инкубируйте дозатор в сборе, чтобы вирусы могли адсорбироваться на поверхностях сетки.
Выньте смесь. Промойте капсулу, удаляя неприлипшие вирусы и фиксаторы. Внесите пипеткой в капсулу раствор уранилацетата, красителя на основе тяжелых металлов. Инкубируйте для того, чтобы пятно контактировало с вирусами.
Ионы уранила связываются со специфическими мембранными гликопротеинами и фосфолипидами на поверхности вирусов. Ионы могут проникать в вирусы и связываться с нуклеокапсидными белками, содержащими геном. Это связывание индуцирует агрегацию и осаждение ионов тяжелых металлов вокруг вируса и конкретных вирусных структур.
Отделите капсулу. Уд
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео