Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:14 мин. • July 8th, 2025
Для специфического окрашивания цитоплазмой клеток в микроокружении мягких тканей получают свежесобранную почку мыши. Обработайте его фиксирующим раствором, содержащим формальдегид, ледяную уксусную кислоту, метанол. Инкубируют при низких температурах.
Формальдегид проникает в клетки, сшивая белки с белками и белки с нуклеиновыми кислотами. Метанол вытесняет воду из тканей и свертывает белки. Уксусная кислота вызывает внутриклеточное закисление и отек тканей, тем самым противодействуя усадке тканей, вызванному метанолом.
Фиксация инактивирует ферменты и стабилизирует морфологию тканей для последующего окрашивания. Удалите излишки фиксаторов с помощью буфера. Инкубируйте ткань с эозином Y, кислотным красителем.
Эозин проникает в неподвижные клетки и попадает в цитоплазму. Кислая среда цитоплазмы в результате обработки уксусной кислотой вызывает максимальное протонирование аминогрупп цитоплазматических белков.
Эозин с отрицательно заряженными функциональными группами электростатически взаимодействует с протонированными группами белков, образуя стабильный краситель-белковый комплекс, и окрашивает цитоплазму в розовый цвет при накоплении. После инкубации разрежьте окрашенную почку на ме
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео