Эозиновое окрашивание образцов мягких тканей: процедура окрашивания всей почки мыши на основе эозина для визуализации специфических микроструктур тканей

0 просмотров3:14 мин • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Для специфического окрашивания цитоплазмой клеток в микроокружении мягких тканей получают свежесобранную почку мыши. Обработайте его фиксирующим раствором, содержащим формальдегид, ледяную уксусную кислоту, метанол. Инкубируют при низких температурах.

Формальдегид проникает в клетки, сшивая белки с белками и белки с нуклеиновыми кислотами. Метанол вытесняет воду из тканей и свертывает белки. Уксусная кислота вызывает внутриклеточное закисление и отек тканей, тем самым противодействуя усадке тканей, вызванному метанолом.

Фиксация инактивирует ферменты и стабилизирует морфологию тканей для последующего окрашивания. Удалите излишки фиксаторов с помощью буфера. Инкубируйте ткань с эозином Y, кислотным красителем.

Эозин проникает в неподвижные клетки и попадает в цитоплазму. Кислая среда цитоплазмы в результате обработки уксусной кислотой вызывает максимальное протонирование аминогрупп цитоплазматических белков.

Эозин с отрицательно заряженными функциональными группами электростатически взаимодействует с протонированными группами белков, образуя стабильный краситель-белковый комплекс, и окрашивает цитоплазму в розовый цвет при накоплении. После инкубации разрежьте окрашенную почку на мелкие кусочки с последующим обезвоживанием тканей при повышении концентрации этанола.

Погрузите почечную ткань в парафин. Получите тонкие срезы ткани с помощью микротома. Далее регидратируйте срезы для микроскопического анализа.

Неокрашенные ядра клеток выглядят белыми на фоне окрашенной в розовый цвет цитоплазмы, что позволяет визуализировать микроструктуры почек, такие как проксимальные извилистые канальцы, состоящие из эпителиальных клеток с щеточной каймой, или собирательные протоки, которые выстланы уплощенными эпителиальными клетками без щеточных границ.

Начните с фиксации образцов мягких тканей. Наполните 50-миллилитровую центрифужную пробирку фиксирующим раствором, содержащим 9,5 миллилитров 4% формальдегида и 0,5 миллилитров ледяной уксусной кислоты. Добавьте образец мягких тканей в пробирку центрифуги и поставьте ее в холодильник на 24–72 часа.

После охлаждения промойте образец мягких тканей раствором DPBS в течение 1 часа. Затем окрасьте образец, поместив его в 2 миллилитра раствора эозина Y-окрашивания, и инкубируйте его на горизонтальной встряхивающей пластине в течение 24 часов.

На следующий день осторожно достаньте образец мягких тканей из контейнера для образца и удалите излишки красителя целлюлозной папиросной бумагой. Поместите его в коническую емкость над паровой фазой этанола для хранения и дальнейшего использования.

07:41

Жесткая встраивание фиксированной и витражи, в целом, миллиметр масштаб образцов для секции Бесплатные 3D гистологии, Микро Компьютерная томография

Похожие видео

0 Просмотры

07:06

Использование микрорентгенй компьютерной томографии с фосхотунгстовой кислотой Препарат для визуализации человека фибромышечной ткани

Похожие видео

0 Просмотры

09:09

Лазерная захват микродиссекция субрегионов глиомы для пространственной и молекулярной характеристики внутриопухолевой гетерогени, онкостримов и вторжения

Похожие видео

0 Просмотры

02:43

Флуоресцентная визуализация колонизации бактерий в ткани почек мышей

Похожие видео

0 Просмотры

03:43

Методика окрашивания органа цельного крепления для трехмерной визуализации почки

Похожие видео

0 Просмотры

09:16

Орган Культура и Всего горе Иммунофлуоресценции Окрашивание мыши Вольфовых Трубочек

Похожие видео

0 Просмотры

10:22

Эхокардиографических и гистологической экспертизы сердечной морфологии в мышь

Похожие видео

0 Просмотры

08:37

Изоляция, фиксации и изображений иммунофлюоресценции мыши надпочечников

Похожие видео

0 Просмотры

06:18

Оптическая очистка и визуализация иммуномаркированных тканей почек

Похожие видео

0 Просмотры

07:01

3D-изображение образцов мягких тканей с помощью рентгеновского метода окрашивания и наноскопической компьютерной томографии

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026