H&E окрашивание срезов тканей, залитых парафином: метод дифференциального окрашивания для визуализации срезов ткани печени с использованием комбинации гематоксилиновых и эозиновых красителей

Начните окрашивание гематоксилином и эозином с предметного стекла, содержащего срез ткани, залитый парафином. Окуните предметное стекло в раствор депарафинизации, содержащий ксилол – органический растворитель, который растворяет слой парафина вокруг ткани, делая его доступным для пятен на последующих этапах.

Обработайте участок ткани абсолютным спиртом, чтобы удалить ксилол. Погрузите ткань в уменьшающуюся концентрацию алкоголя. На этом этапе ткань регидратируется путем замены спирта водой для лучшей совместимости с водорастворимыми красителями.

Окрашивают ткань основным гематоксилином, который в окисленной форме связывается с протравой – катионом металла. Этот комплекс электростатически связывается с нуклеиновыми кислотами в геноме, окрашивая ядро в фиолетовый цвет.

Погрузите окрашенный участок в кислотный раствор для дифференцировки, чтобы удалить избыток гематоксилина из цитоплазмы, в результате чего ядро, удерживающее краситель, будет казаться отчетливым. Обработайте ткани щелочным синяющим средством для нейтрализации свободных кислот. Это регрессирует фиолетовый цвет красителя до синего, усиливая ядерные детали.

Погрузите предметное стекло в кислый раствор эозина, чтобы окраси