Окрашивание срезов тканей крезил-фиолетовым: процедура окрашивания для визуализации хрящей и костей в замороженных срезах эмбриона мыши

0 просмотров3:32 мин • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Чтобы визуализировать хрящевые и костные участки в срезе ткани, начните со предметного стекла, на котором будет изображен тонкий срез ткани замороженного эмбриона мыши.

Кратковременно разморозьте криоразрез и погрузите его в соответствующую концентрацию этанола, чтобы удалить криосреду. Этап удаления помогает предотвратить разрыхление среды, которое в противном случае может повлиять на визуализацию тканей во время окрашивания. Кроме того, этанол фиксирует ткани, поддерживая их морфологию и целостность.

Далее нанесите пипеткой на ткань раствор крезилового фиалки. Крезиловый фиалка, положительно заряженный основной краситель, связывается с полианионными фрагментами, такими как протеогликаны в матриксе хрящевой ткани. В то время как в минерализованной ткани, такой как кости, он реагирует с отрицательно заряженными группами, такими как фосфатные группы в костном матриксе.

Являясь метахроматическим красителем, крезилово-фиолетовый окрашивает различные участки ткани в цвета, отличные от натурального красителя, в зависимости от его взаимодействия с различными химическими компонентами в этих областях.

Теперь постирайте салфетку в подходящей концентрации этанола, чтобы удалить излишки пятна. Погружайте ткань в увеличивающуюся концентрацию этанола, чтобы заменить воду из ткани, обезвоживая ткань. Промойте ткань ксилолом, чтобы вытеснить этанол, сделав ткань прозрачной для микроскопии.

Под световым микроскопом хрящевая ткань выглядит пурпурной, в то время как костная ткань кажется коричневой, что способствует их дифференциации друг от друга, а также от окружающих тканей.

Подготовьте три промаркированные 50-миллилитровые центрифужные пробирки. Добавьте в каждую тюбик по 45 миллилитров 80% этанола. Положите на лед три трубки. Поместите на лед пробирку, содержащую 45 миллилитров 95% этанола, и пробирку, содержащую 100% этанол. Далее добавьте 45 миллилитров ксилола в 50-миллилитровую центрифужную пробирку комнатной температуры.

Кратковременно разморозьте предметное стекло мембраны PEN, приложив его к руке в перчатке, и промойте его дважды в течение 30 секунд в каждой из пробирок, содержащих 80% этанола, с перемешиванием, чтобы удалить оптимальный температурный состав для резки. Затем разложите горку на листе алюминиевой фольги. Нанесите пипеткой 0,8 миллилитра 0,1% кресилфиолета в 50% этаноле на предметное стекло и окрашивайте в течение 30 секунд.

Промойте предметное стекло в третьей пробирке, содержащей 80% этанола, в течение 30 секунд. Обезвожьте предметное стекло, пропустив его через трубку, содержащую 95% этанола, в течение 30 секунд, пробирку, содержащую 100% этанол, в течение 30 секунд и, наконец, через трубку, содержащую ксилол, в течение 30 секунд. После этого поместите предметные стекла на деликатный рабочий стеклоочиститель на 5 минут, чтобы ксилол стекал и дал секциям высохнуть.

10:26

Нейроны обработки изображений внутри толстых срезов мозга с помощью метода Гольджи-Кокса

Похожие видео

0 Просмотры

09:29

Стереотаксическая Атлас руководствуясь лазерная захватить Microdissection регионов мозга, пострадавших от травмы

Похожие видео

0 Просмотры

09:09

Лазерная захват микродиссекция субрегионов глиомы для пространственной и молекулярной характеристики внутриопухолевой гетерогени, онкостримов и вторжения

Похожие видео

0 Просмотры

09:58

Метод маркировки сосудистую в эмбриональных мышей

Похожие видео

0 Просмотры

02:41

Фиксация и окрашивание срезов криоконсервированной ткани: процедура обработки замороженных срезов ткани мозга для лазерной микродиссекции

Похожие видео

0 Просмотры

02:46

Иммуноокрашивание черепно-лицевых тканей мышей

Похожие видео

0 Просмотры

09:31

Автоматизированная Количественное кроветворной клетки - Стромальные межклеточного взаимодействия в гистологических Изображения Undecalcified Bone

Похожие видео

0 Просмотры

10:03

Ткань Подготовка и иммуностоирование мыши Craniofacial тканей и недекализированных костей

Похожие видео

0 Просмотры

07:41

Клональная генетическая трассировка с помощью мыши Confetti для изучения минерализованных тканей

Похожие видео

0 Просмотры

09:20

Лазерная захват микродиссекции мыши эмбрионального хряща и кости для анализа экспрессии генов

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026