Окрашивание амилоидных отложений hFTAA: метод визуализации амилоидных фибрилл с использованием красителя на основе олиготиофена для флуоресцентной визуализации в срезах тканей

Отложение неправильно свернутых белковых агрегатов – амилоидов во внеклеточном тканевом пространстве является признаком различных протеопатических заболеваний. Эти амилоиды состоят из бета-листов, которые выравниваются перпендикулярно фибриллярной оси, образуя перекрестные бета-листовые повторы.

Чтобы обнаружить амилоидные отложения с помощью гептамер-формилтиофеновой уксусной кислоты или hFTAA, берут фиксированный формалином, залитый парафином срез ткани, содержащий амилоидные отложения.

Обработайте срезы ксилолом для депарафинизации ткани для улучшения доступности пятна на последующих этапах. Добавьте несколько капель окрашивающего раствора hFTAA на участок ткани и инкубируйте, чтобы краситель проник в ткань.

hFTAA содержит семь сопряженных серосодержащих тиофеновых звеньев и концевых карбоксильных групп, присоединенных к тиофеновой магистрали. Эти свойства обеспечивают гибкость несвязанного красителя. Во время инкубации конечные карбоксильные группы красителя связываются с положительно заряженными аминокислотными остатками, выстилающими гидрофобную канавку бета-листа посредством электростатических взаимодействий.

Следовательно, происходит конформационное изменение, которое снижа