Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:37 мин. • July 8th, 2025
Остеобласты — это костеобразующие клетки, которые выделяют небольшие везикулы в свой внеклеточный матрикс, ECM. Эти везикулы, называемые матричными везикулами, оснащены мембранными транспортерами и ферментами, которые обеспечивают проникновение ионов кальция и фосфата, образуя внутри них минеральные кристаллы. По мере накопления кристаллов они прорываются через мембрану везикулы, образуя минерализованные узелки в ВКМ, составляющие минеральную плотность кости.
Чтобы визуализировать минерализацию, начните с клеток остеобластов на биосовместимом каркасе в подходящей питательной среде. Остеобласты прикрепляются к каркасу и используют факторы роста из среды для секреции матричных везикул, которые впоследствии образуют минерализованные узелки в ВКМ.
Отсадите питательную среду и промойте клетки, чтобы удалить следы среды. Обрабатывайте клетки раствором формалина, который индуцирует сшивание ВКМ, фиксацию и сохранение структуры ткани. Промойте ячейки, чтобы удалить остатки формалина.
Далее добавьте раствор для окрашивания Ализарин Красный и инкубируйте культуру. Молекулы красителя связываются с минерализованным узелком и связываются с кальцием, ключевым минералом для костей, образуя больши
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео