Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 2:42 мин. • July 8th, 2025
Протеогликаны состоят из основного белка, ковалентно присоединенного к сульфатированным гликозаминогликановым цепям.
Чтобы визуализировать протеогликаны, начните с основанных на коллагене скаффолдов — пористого полимерного субстрата — и засейте на них суспензию мезенхимальных стволовых клеток, или МСК. Это обеспечивает структурную поддержку МСК и позволяет им расти как на поверхности, так и внутри полостей каркасов.
Обрабатывайте конструкции в среде хондрогенной дифференцировки, содержащей трансформирующие факторы роста, которые стимулируют трансформацию МСК в зрелые хондроциты - хрящевые клетки. Зрелые хондроциты выделяют протеогликаны, которые образуют сеть с коллагеном в каркасе.
Возьмите срез, приготовленный из конструкции, насыщенной хондроцитами. Добавьте кислый раствор красителя альцианской синевы, дополненный гидрохлоридом гуанидия, и инкубируйте. Во время инкубации гидрохлорид гуанидина в растворе красителя диссоциирует любые агрегаты протеогликанов для лучшего окрашивания.
Впоследствии отрицательно заряженные сульфатированные гликозаминогликаны из протеогликанов связываются с содержащими медь положительно заряженными молекулами красителя алкийского синего, что приводит к
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео