Окрашивание маулы на лигнин: методика определения характеристик распределения лигнина в срезах стеблей Arabidopsis Thaliana

Лигнин является важным структурным компонентом в клеточной стенке растения. Это полимер, состоящий в основном из сирингиловых спиртов, или S-лигниновых звеньев, и гваиациловых спиртов, или G-лигниновых звеньев, и небольшой популяции паракумариловых спиртов, называемых H-лигниновыми звеньями.

Содержание S-лигнина различается в различных вторичных тканях растений. В основном он содержится в ксиларных сосудах и волокнах, а также в межфасцикулярных волокнах, где он обеспечивает структурную поддержку.

Чтобы определить наличие S-лигнина, возьмите залитые агарозой двудольные срезы стебля в пробирке. Обработайте срезы стебля последовательно раствором для окрашивания марганцовкой, затем разведенной соляной кислотой, и, наконец, гидроксидом аммония – слабым основанием.

Во время этого лечения фрагмент S-лигнина, присутствующий в клеточной стенке, претерпевает ряд изменений, чтобы в конечном итоге образовать продукт, который выглядит красным.

Интенсивность красной окраски ниже в ксилемных клетках из-за присутствия меньшего количества S-лигнина по сравнению с межфасцикулярными волокнами, которые кажутся более глубокими красными. Перенесите срезы на предметное стекло и визуализируйте их под свет