Разделение вариантов миколиевой кислоты на основе тонкослойной хроматографии: метод разделения липидов клеточной стенки микобактерий на основе полярности

0 views • 3:26 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Клеточная стенка микобактерий содержит различные варианты миколиевых кислот – длинноцепочечные жирные кислоты с консервативными альфа-цепями. В их бета-цепях существуют структурные различия, что приводит к вариациям полярности различных миколовых кислот.

Чтобы разделить варианты с помощью тонкослойной хроматографии, или ТСХ – метода жидкостной хроматографии – берут липиды клеточной стенки микобактерий в нужном органическом растворителе. Обнажите липиды у основания пластины TLC, предварительно покрытой тонким слоем адсорбирующего материала, который функционирует как неподвижная фаза.

Поместите планшет в банку, содержащую органический растворитель - подвижную фазу, - убедившись, что уровень жидкости находится ниже пятен образца, чтобы предотвратить преждевременную диффузию миколиевых кислот.

Во время прогона подвижная фаза поднимается через крошечные поры адсорбентного слоя на пластине за счет капиллярного действия. В конце концов, миколовые кислоты растворяются в растворителе и перемещаются вверх.

Более полярные варианты миколиевой кислоты временно адсорбируются полярной стационарной фазой с помощью межмолекулярных сил, препятствуя их восходящему движению. Меньшее количество полярных миколовых кислот остается в неполярной подвижной фазе и мигрирует дальше.

Различия в миграции приводят к тому, что варианты миколиевой кислоты разделяются на дискретные полосы.

По завершению опрыскайте высохшую пластину пятном с фосфомолибдоновой кислотой. Нагрейте пластину, чтобы уменьшить пятно в присутствии липидов, придающих полосам темно-зеленый цвет.

Для анализа образцов методом ТСХ накройте одну стенку камеры ТСХ листом фильтровальной бумаги. Нанесите вазелин на углы камеры, чтобы запечатать камеру. Сцедите смесь растворителя на фильтровальную бумагу и добавьте оставшийся объем растворителя на дно камеры TLC. Закройте камеру TLC не менее чем на 20 минут, чтобы насытить ее

Тем временем растворите липиды в стеклянной трубке в 200-1000 микролитрах хлороформа и с помощью капиллярной стеклянной трубки нанесите 10 микролитров липидно-хлороформной суспензии непосредственно на пластину TLC. Дав образцу высохнуть в течение пяти минут, вставьте планшет в насыщенную камеру TLC и дайте подвижной фазе пройти через TLC.

Когда растворитель достигнет 1 сантиметра от верхнего конца пластины, поместите пластину под ламинарный флюс до полного высыхания диоксида кремния. Затем распылите на высушенную пластину от 15 до 20 миллилитров 10% гидрата молибдатофосфорной кислоты в этаноле, пока пластина не станет ярко-желтой, и нагрейте пластину в течение двух-пяти минут при температуре 120 градусов Цельсия.

06:30

Использование Microtiter Блюдо Радиомаркировка для нескольких В Ививо Измерения Escherichia coli (p)ppGpp Следуют Тонкий слой хроматографии

Related Videos

0 Views

08:30

Анализ синтеза нейтральных липидов в Saccharomyces cerevisiae методом метаболической маркировки и тонкослойной хроматографии

Related Videos

0 Views

14:59

Определение общего количества липидов и классов липидов в морских образцах

Related Videos

0 Views

09:26

Сотовая Добыча липидов для целевой Стабильный изотопного разбавления жидкостной хроматографии-масс-спектрометрического анализа

Related Videos

0 Views

12:57

Выделение и химическая характеристика липида А из грамотрицательных бактерий

Related Videos

0 Views

11:18

Изоляция и подготовка бактериальных клеточных стенок для композиционного анализа с помощью ультра производительности жидкой хроматографии

Related Videos

0 Views

08:59

Определение субстрата специфичностью для липазы и фосфолипазы кандидатов

Related Videos

0 Views

07:55

Химическая изоляция, количественной оценки и разделение липиды кожи рептилий

Related Videos

0 Views

08:56

Количественный анализ клеточного липидома Сахаромиса Церевизии с использованием жидкой хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией

Related Videos

0 Views

07:42

Анализ липидного состава микобактерий методом тонкослойной хроматографии

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026