Разделение вариантов миколиевой кислоты на основе тонкослойной хроматографии: метод разделения липидов клеточной стенки микобактерий на основе полярности

Клеточная стенка микобактерий содержит различные варианты миколиевых кислот – длинноцепочечные жирные кислоты с консервативными альфа-цепями. В их бета-цепях существуют структурные различия, что приводит к вариациям полярности различных миколовых кислот.

Чтобы разделить варианты с помощью тонкослойной хроматографии, или ТСХ – метода жидкостной хроматографии – берут липиды клеточной стенки микобактерий в нужном органическом растворителе. Обнажите липиды у основания пластины TLC, предварительно покрытой тонким слоем адсорбирующего материала, который функционирует как неподвижная фаза.

Поместите планшет в банку, содержащую органический растворитель - подвижную фазу, - убедившись, что уровень жидкости находится ниже пятен образца, чтобы предотвратить преждевременную диффузию миколиевых кислот.

Во время прогона подвижная фаза поднимается через крошечные поры адсорбентного слоя на пластине за счет капиллярного действия. В конце концов, миколовые кислоты растворяются в растворителе и перемещаются вверх.

Более полярные варианты миколиевой кислоты временно адсорбируются полярной стационарной фазой с помощью межмолекулярных сил, препятствуя их восходящему движению. Меньшее количество полярны