Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 8:15 мин. • July 8th, 2025
Гликоген, разветвленный полимер глюкозы, является энергетическим резервом в субклеточных межмиофибриллярных, внутримиофибриллярных и субсарколеммальных компартментах скелетных мышц человека.
Для количественной оценки субклеточного распределения гликогена с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) получают изолированную скелетную мышечную ткань человека. Закрепить глутаральдегидом для сохранения структуры тканей. Постфиксируйте ткань в растворе тетраоксида осмия и ферроцианида калия.
Восстановленный комплекс осмий-ферроцианид связывается с гидроксильными группами в гликогене, улучшая контраст частиц гликогена в мышцах. Кроме того, окрашиваются мембраны и саркоплазматический ретикулум — мембраносвязанная органелла.
Обезвоживайте ткани при повышении концентрации этанола. Заделывают в смолу, формируя твердый блок. Получить ультратонкие срезы с продольно ориентированными мышечными волокнами; перенос на сетки ПЭМ.
Погрузите решетки в раствор уранилацетата, тяжелого металла. Ионы уранила связываются с отрицательно заряженными липидами и белками, делая их электронно-плотными. Окрасить раствором цитрата свинца.
Ионы свинца связываются с окрашенными осмием областями, включая част
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео